[发明专利]一种大黄粉指纹图谱的检测方法及其应用

权利要求书

1.一种大黄粉指纹图谱的检测方法，包括以下步骤：

1)供试品溶液的制备：将大黄粉样品加入有机溶剂溶解，超声提取后冷却，取上清液过滤，取续滤液即得供试品溶液；

2)对照品溶液的制备：提供对照品溶液，所述对照品溶液包括芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷、芦荟大黄素-3-羟甲基-O-葡萄糖苷、大黄酸-8-O-葡萄糖苷、大黄素-8-O-葡萄糖苷、大黄素-1-O-葡萄糖苷、大黄酚-8-O-葡萄糖苷、大黄酚-1-O-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷、番泻苷A对照品和有机溶剂；

3)测定：采用相同色谱条件的高效液相色谱法分别测定供试品溶液和对照品溶液，获得供试品溶液的指纹图谱和对照品溶液的指纹图谱，将供试品溶液的指纹图谱与对照品溶液的指纹图谱进行比较，对供试品溶液指纹图谱中的指标成分进行归属定位，从而获得大黄粉指纹图谱。

2.根据权利要求1所述的一种大黄粉指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤1)中，包括以下条件中任一项或多项：

A1)所述大黄粉样品在制备供试品溶液前要进行⁶⁰Co-γ射线辐照；所述⁶⁰Co-γ射线辐照的剂量为3-10KGy；

A2)所述大黄粉样品加入的重量g与所述有机溶剂加入的体积mL之比为0.2：20-30；

A3)所述有机溶剂为甲醇；

A4)所述超声提取时间为40-50min。

3.根据权利要求1所述的一种大黄粉指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤2)中，包括以下条件中任一项或多项：

B1)所述对照品溶液中各成分的含量范围为：芦荟大黄素为0.30-75.15μg/ml、大黄酸为0.08-20.06μg/ml、大黄素为0.16-41.22μg/ml、大黄酚为0.99-248.98μg/ml、大黄素甲醚为0.34-84.54μg/ml、芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷为0.71-178.39μg/ml、芦荟大黄素-3-羟甲基-O-葡萄糖苷为0.12-28.91μg/ml、大黄酸-8-O-葡萄糖苷为0.15-37.85μg/ml、大黄素-8-O-葡萄糖苷为0.13-32.56μg/ml、大黄素-1-O-葡萄糖苷为0.10-25.72μg/ml、大黄酚-8-O-葡萄糖苷为0.60-149.39μg/ml、大黄酚-1-O-葡萄糖苷为0.33-83.27μg/ml、大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷为0.26-66.12μg/ml、番泻苷A为0.76-37.94μg/ml；

B2)所述有机溶剂为甲醇。

4.根据权利要求1所述的一种大黄粉指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤3)中，所述高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱为T3色谱柱；检测器为光电二极管阵列检测器PDA；柱温为25-35℃；进样量为0.5-10μL；流速为0.1-1.0mL/min；检测波长为400-420nm；流动相为甲醇-0.05-0.2％磷酸水溶液，其中，A相为甲醇，B相为0.05-0.2％磷酸水溶液；分析时间为31min；梯度洗脱。

5.根据权利要求4所述的一种大黄粉指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的具体程序为：0-6min，A相：B相体积比为41：59-45：55；6-8min，A相：B相体积比为45：55-52：48；8-14min，A相：B相体积比为52：48-54：46；14-19min，A相：B相体积比为54：46-69：31；19-23min，A相：B相体积比为69：31-79：21；23-25min，A相：B相体积比为79：21-99：1；25-30min，A相：B相体积比为99：1-100：0；30-31min，A相：B相体积比为100：0-41：59。

6.根据权利要求1-5任一所述的一种大黄粉指纹图谱的检测方法在大黄粉中成分的质量检测中的用途。

7.一种大黄粉的质量检测方法，包括采用权利要求1-5任一所述的大黄粉指纹图谱的检测方法获得大黄粉指纹图谱，将得到的大黄粉指纹图谱与相同指纹图谱检测条件下获得的大黄粉的标准指纹图谱进行相似度比较。