[发明专利]一种新鲜组织样本的保存液、制备方法及其应用在审
| 申请号： | 202110126162.X | 申请日： | 2021-01-29 |
| 公开（公告）号： | CN112779314A | 公开（公告）日： | 2021-05-11 |
| 发明（设计）人： | 王宗秀;王一凡;易康 | 申请（专利权）人： | 南京诺因生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/24 | 分类号： | C12Q1/24;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 南京禾易知识产权代理有限公司 32320 | 代理人： | 张松云 |
| 地址： | 211800 江苏省南京市江北新区新锦湖路*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 新鲜 组织 样本 保存 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种新鲜组织样本的保存液，其特征在于，所述保存液由EDTA、Tris、草酸铵、柠檬酸钠、甘油以及胎牛血清组成，其中，所述EDTA的最终浓度为50～100mg/L，Tris的最终浓度为2.01～4.04g/L，草酸铵的最终浓度为120～200mg/L，柠檬酸钠的最终浓度为1.8～2.4g/L，甘油的最终浓度为300-400g/L，胎牛血清的最终浓度为130-180g/L，余量为DEPC水。
2.根据权利要求1所述的新鲜组织样本的保存液，其特征在于，所述保存液由EDTA、Tris、草酸铵、柠檬酸钠、甘油以及胎牛血清组成，其中，所述EDTA的最终浓度为65mg/L，Tris的最终浓度为3.55g/L，草酸铵的最终浓度为160mg/L，柠檬酸钠的最终浓度为2.2g/L，甘油的最终浓度为350g/L，胎牛血清的最终浓度为175g/L，余量为DEPC水。
3.根据权利要求1-2所述的新鲜组织样本的保存液，其特征在于，所述保存液的pH值为7.0～9.0。
4.根据权利要求3所述的新鲜组织样本的保存液，其特征在于，所述保存液的适用样本为人组织活检标本，所述适用样本可用于DNA检测或/和RNA检测。
5.一种根据权利要求4所述的新鲜组织样本的保存液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、配置溶液：将EDTA、Tris、草酸铵、柠檬酸钠、甘油以及胎牛血清分别溶于DEPC水中配置成溶液；
S2、将S1中配置的溶液混合并搅拌均匀后调整pH至7.5～8.5后用DEPC水定容；
S3、滤膜过滤S2中所得溶液，保存得到所述新鲜组织样本保存液。
6.根据权利要求5所述的新鲜组织样本的保存液的制备方法，其特征在于，所述S3中滤膜的孔径为0.2～0.3μm。
7.一种新鲜组织样本的保存液的应用，其特征在于，包括如下步骤：
a、设置实验组和对照组，实验组：取20mm3已感染麻疹病毒的小白鼠组织置于4mL所述的保存液中；对照组1：取20mm3已感染麻疹病毒的小白鼠组织置于空的无菌保存管中；对照组2：取20mm3已感染麻疹病毒的小白鼠组织置于4mL的0.9％生理盐水中；
b、提取S1中实验组、对照组1以及对照组2中的病毒RNA；
c、将S2中获得的RNA进行逆转录反应；
d、将S3中获得的逆转录RNA进行琼脂糖凝胶电泳。
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