[发明专利]一种大规模制备传代鸡胚细胞生产病毒的方法

权利要求书

1.一种动物细胞传代培养的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：

(S1) 提供一原代动物细胞P0；

(S2) 将所述的原代动物细胞P0，在浓度C0的二氧化碳条件下，在细胞培养液中进行传代培养，从而获得第n代的传代细胞Pn，其中n为传代次数；

其中，所述培养液包含基础培养液和强化添加物，所述强化添加物包括：

(1)亚油酸或亚油酸钠；浓度为1×10^-4～5×10^-4mM；

(2)亚硒酸或亚硒酸钠；浓度为3×10^-6～5×10^-5mM；

(3)偏钒酸铵；浓度为1×10^-8～5×10^-6mM；和

(4)硫辛酸；浓度为5×10^-6～1.5×10^-5mM；

在步骤(S2)中，二氧化碳的浓度C0≤1%(v/v)；

n为选自1～40的任一正整数；所述动物细胞为鸡胚细胞。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的n为选自2~20的任一正整数。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的n为选自3~6的任一正整数。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的n为选自6~10的任一正整数。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(S2)中，二氧化碳的浓度C0≤0.05%(v/v)。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，C0≤0.04(v/v)。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述强化添加物含有以下成分：

(1) 亚油酸，浓度为1×10^-4～5×10^-4mM；

(2) 亚硒酸钠，浓度为3×10^-6～5×10^-5mM；

(3) 偏钒酸铵，浓度为1×10^-8～5×10^-6mM；和

(4) 硫辛酸，浓度为5×10^-6～1.5×10^-5mM。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述强化添加物含有以下成分：

(1)亚油酸钠，浓度为1×10^-4～5×10^-4mM；

(2)亚硒酸，浓度为3×10^-6～5×10^-5mM；

(3)偏钒酸铵，浓度为1×10^-8～5×10^-6mM；和

(4)硫辛酸，浓度为5×10^-6～1.5×10^-5mM。