[发明专利]双特异性CS1-BCMA CAR-T细胞及其应用

权利要求书

1.一种双特异性嵌合抗原受体(CAR)，其特征在于，所述嵌合抗原受体的结构如下式I所示：

L-scFv1-I-scFv2-H-TM-C-CD3ζ (I)

式中，

各“-”独立地为连接肽或肽键；

L为任选的信号肽序列；

I为柔性接头；

H为任选的铰链区；

TM为跨膜结构域；

C为共刺激信号分子；

CD3ζ为源于CD3ζ的胞浆信号传导序列；

scFv1为靶向CS1的抗原结合结构域，scFv2为靶向BCMA的抗原结合结构域；

其中，所述靶向CS1的抗原结合结构域的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；和

所述靶向BCMA的抗原结合结构域的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。

2.权利要求1所述的CAR，其特征在于，所述靶向CS1的抗原结合结构域的结构如下式A所示：

V_H1-V_L1 (A)；

式中，V_H1为抗CS1抗体重链可变区；V_L1为抗CS1抗体轻链可变区；“-”为连接肽或肽键。

3.权利要求1所述的CAR，其特征在于，所述靶向BCMA的抗原结合结构域的结构如下式C所示：

V_L2-V_H2 (C)；

式中，V_L2为抗BCMA抗体轻链可变区；V_H2为抗BCMA抗体重链可变区；“-”为连接肽或肽键。

4.如权利要求1所述的CAR，其特征在于，所述的scFv1和/或scFv2为鼠源、人源、人源和鼠源嵌合、或者全人源化的单链抗体可变区片段。

5.权利要求1所述的CAR，其特征在于，所述L为CD8来源的信号肽，其氨基酸序列如SEQID NO:7所示。

6.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的CAR。

7.一种载体，其特征在于，所述的载体含有权利要求6所述的核酸分子。

8.一种工程化的免疫细胞，其特征在于，所述的免疫细胞表达有权利要求1所述的CAR。

9.如权利要求8所述的免疫细胞，其特征在于，所述细胞为CAR-T细胞或CAR-NK细胞。

10.一种制剂，其特征在于，所述制剂含有权利要求1所述的CAR、权利要求6所述的核酸分子、权利要求7所述的载体、或权利要求8所述的免疫细胞，以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

11.一种权利要求1所述的CAR、权利要求6所述的核酸分子、权利要求7所述的载体、或权利要求8所述的免疫细胞的用途，其特征在于，用于制备预防和/或治疗癌症或肿瘤的药物或制剂。

12.如权利要求11所述的用途，其特征在于，所述的肿瘤为CS1和/或BCMA阳性肿瘤。

13.如权利要求12所述的用途，其特征在于，所述的CS1和/或BCMA阳性肿瘤包括多发性骨肉瘤。

14.一种用于制备权利要求8所述工程化的免疫细胞的试剂盒，所述试剂盒含有容器，以及位于容器内的如权利要求6所述的核酸分子、或如权利要求7所述的载体。

15.一种制备工程化的免疫细胞的方法，其特征在于，所述的免疫细胞表达权利要求1所述的CAR，所述方法包括以下步骤：

(a)提供待改造的免疫细胞；和

(b)将权利要求6所述的核酸分子或权利要求7所述的载体转导入所述免疫细胞内，从而获得所述工程化的免疫细胞。