[发明专利]一种含有生殖干细胞的修复组合物及其制备方法

说明书

本发明公开了一种含有生殖干细胞的修复组合物及其制备方法，包括子宫内膜干细胞、β‑雌二醇、淫羊藿苷、生理盐水；所述人子宫内膜干细胞的含量为2×10⁵~1×10⁶个/mL；所述β‑雌二醇的含量为0.3~0.8mg/ml；所述淫羊藿苷的含量为0.3~0.8mg/ml。所述的含有生殖干细胞的修复组合物具有良好的抑制卵巢早衰作用子宫内膜干细胞与β‑雌二醇联用，二者具有良好的协同增效作用，进一步加入淫羊藿苷起到辅助修复卵巢早衰作用，从而三者具有良好的协同增效作用。且所制备得到的子宫内膜干细胞具有良好的活力，细胞活性高、自我更新和分化强。

技术领域

本发明涉及干细胞技术领域，具体涉及一种含有生殖干细胞的修复组合物及其制备方法。

背景技术

随着肿瘤患者年轻化以及生存率的提高，化疗药物所致医源性损害逐渐得到重视。卵巢是生殖系统中对化疗最为敏感的部位，大剂量、长时间的化疗可破坏卵巢组织，导致卵巢功能早衰。卵巢早衰是较为常见的妇科内分泌疾病，以女性青春期之后，40岁之前出现4个月以上的持续闭经，血清雌激素水平降低，卵泡刺激素水平升高为特征。POF致女性闭经、不孕、性功能低下，同时骨质疏松、高脂血症、心血管疾病等的患病风险也大大增加，严重危害女性的身心健康和家庭和睦。

发明内容

本发明提供一种含有生殖干细胞的修复组合物及其制备方法，所述的修复组合物具有良好的抑制卵巢早衰作用。

本发明解决其技术问题采用以下技术方案：

一种含有生殖干细胞的修复组合物，包括子宫内膜干细胞、β-雌二醇、淫羊藿苷、生理盐水；

所述人子宫内膜干细胞的含量为2×10⁵~1×10⁶个/mL；

所述β-雌二醇的含量为0.3~0.8mg/ml；

所述淫羊藿苷的含量为0.3~0.8mg/ml。

本发明的发明人在大量的研究中发现，子宫内膜干细胞对卵巢组织有修复作用，并可改善卵巢的内分泌功能。

β-雌二醇可促使子宫内膜恢复正常增殖，改善卵巢内分泌，有助于妊娠。

淫羊藿苷可作为免疫促进剂或调节剂，同时具有抗病毒、抗应激、抗氧化等作用，提高人体免疫力，促进机体恢复，配伍性能好。

同时发明人发现，子宫内膜干细胞与β-雌二醇联用，二者具有良好的协同增效作用，进一步加入淫羊藿苷起到辅助修复卵巢早衰作用，从而三者具有良好的协同增效作用。

作为一种优选方案，所述子宫内膜干细胞的含量为4×10⁵个/mL。

作为一种优选方案，所述β-雌二醇的含量为0.6mg/ml。

作为一种优选方案，所述淫羊藿苷的含量为0.5mg/ml。

作为一种优选方案，所述子宫内膜干细胞的制备方法为：

S1、采集经血，向10~20重量份经血中加入20~50重量份的PBS缓冲液，再加入10~20重量份的分离液，第一次离心，取中间层，加入0.2~0.6重量份Ⅰ型胶原酶，混合均匀，第二次离心，弃上清，得到细胞沉淀；

S2、将细胞沉淀用生理盐水配制成2× 10⁴~1× 10⁵个/ml的浓度，并接种于原代培养基，在33~37℃、体积分数为4.8~5.2%CO₂的培养箱中培养10~24h，得到P0代细胞；

S3、将P0代细胞用生理盐水配制成2× 10⁴~1× 10⁵个/ml的浓度，接种于传代培养基，在33~37℃、体积分数为4.8~5.2%CO₂的培养箱中培养至细胞融合度大于85%，收集细胞，重复至P5代；即得子宫内膜干细胞。