[发明专利]一种髓母细胞瘤细胞的3D培养方法及其在药物筛选中的应用有效
| 申请号： | 202110132989.1 | 申请日： | 2021-02-01 |
| 公开（公告）号： | CN112813029B | 公开（公告）日： | 2023-08-18 |
| 发明（设计）人： | 吴春勇;何原子;张峻颖;康立峰;陈俊根;庄肯 | 申请（专利权）人： | 中国药科大学 |
| 主分类号： | C12N5/09 | 分类号： | C12N5/09;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 北京君有知识产权代理事务所(普通合伙) 11630 | 代理人： | 焦丽雅 |
| 地址： | 211198 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细胞 培养 方法 及其 药物 筛选 中的 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种髓母细胞瘤细胞的3D培养体系，其特征在于，包括3D羟丙基纤维素微孔支架和髓母细胞瘤3D球样体专用培养基，所述3D球样体专用培养基为MEM基础培养基添加10％(v:v)胎牛血清和1％(v:v)非必需氨基酸，
其中，所述非必需氨基酸为890mg/l L-丙氨酸、1470mg/l L-谷氨酸、1320mg/l L-天冬酰胺、1330mg/l L-天(门)冬氨酸、1150mg/l L-脯氨酸、1050mg/l L-丝氨酸和750mg/l甘氨酸的混合溶液。
2.一种培养髓母细胞瘤细胞的方法，包括以下步骤：使用权利要求1所述髓母细胞瘤细胞的3D培养体系培养髓母细胞瘤细胞。
3.如权利要求2所述的培养髓母细胞瘤细胞的方法，所述髓母细胞瘤细胞为人髓母细胞瘤DAOY细胞系，由平面扩增或冻存复苏后的DAOY细胞系制备而成。
4.如权利要求2或3所述的培养髓母细胞瘤细胞的方法，其中，培养条件为温度37℃，CO2体积浓度为5％。
5.如权利要求2或3所述的培养髓母细胞瘤细胞的方法，其中，髓母细胞瘤细胞的接种密度为1-5×106个细胞/ml。
6.权利要求1所述的髓母细胞瘤细胞的3D培养体系在药物筛选和细胞活力检测中的应用。
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