[发明专利]一种保元汤制剂的HPLC特征图谱及其构建方法

说明书

本发明公开了一种保元汤制剂的HPLC特征图谱及其构建方法，构建方法包括以下步骤：(1)样品溶液的制备；(2)参照物溶液的制备；(3)HPLC特征图谱的建立。本发明建立了一种能鉴别出保元汤处方中所有药味的特征图谱质量评价方法，具有操作简单、稳定、灵敏、精密度高等优点，采用同一种方法能鉴别出处方中所有药味以用于质量控制。

技术领域

本发明属于中药和功能食品原料及其制品的指纹图谱技术领域，具体涉及一种保元汤制剂的HPLC特征图谱及其构建方法。

背景技术

保元汤出自明孙志宏编纂的《简明医彀》(1629年)，是古代经典名方，其组方由人参、黄芪、甘草、肉桂组成，煎煮时加生姜一片。保元汤能益气温阳，传统用于治疗元气虚弱，精神倦怠，肌肉柔慢，饮食少进，面色白，睡卧宁静，痘顶不起等症。现代临床广泛用于冠心病、慢性肾衰、再生障碍性贫血、乙型肝炎、白细胞减少等病证的治疗。

中药复方制剂均为多组分复杂体系，质量控制难度较大。特征图谱是一种综合的可量化的质量控制手段，能较全面地反映复方制剂中所含成分类型及含量，进而对药品质量进行整体描述和评价，对于阐明药效物质基础，促进中药现代化具有重要意义。

保元汤由五味中药组成，其主要化学成分类型为皂苷类和黄酮类，还有少部分的原花青素类、木质素类以及挥发油等。目前为止，关于保元汤的质量控制方法已有少量文献进行报道；但用同一种方法能鉴别出处方中所有药味的质量控制方法还未有文献报道。

现有的HPLC特征图谱的检测方法公开了保元汤的特征图谱，共有11个特征峰，并对其中3个已知峰进行了指认，分别为人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1，并归属11个特征峰分别来自人参、黄芪、甘草。但一方面其并未指认肉桂、生姜的成分；另一方面保元汤中有5味药材，只检测出11个特征峰所给的化学信息检测结果单薄。

现有技术公开了保元汤的指纹图谱，并通过DAD检测出41个共有峰，ELSD检测到19个共有峰，归属了12个已知峰。但其检测出的色谱峰中未检测出生姜的色谱峰，检测结果不完善。其次，其供试品溶液制备方法采用向保元汤制剂的水溶液中加入无水乙醇提取，旋蒸后，甲醇稀释过滤得到，仅对液体或固体制剂的水溶液进行提取，提取成分与传统的经典名方不完全符合，可能不能代表经典名方保元汤中真实的化学成分组成。

发明内容

本发明的目的在于：针对上述现有技术中尚无简单有效稳定的方法检测保元汤成分及鉴别其质量的问题，提供一种保元汤制剂的HPLC特征图谱及其构建方法，检测结果完善，从整体特征面貌上把握保元汤制剂质量情况。

本发明采用的技术方案如下：

一种保元汤制剂的HPLC特征图谱的构建方法，包括以下步骤：

(1)样品溶液的制备

取保元汤制剂研细，加入80vt％的甲醇水溶液超声溶解，过滤，取滤液；

(2)参照物溶液的制备

取毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、甘草酸铵作为对照品，分别加入80vt％甲醇制成溶液；

(3)HPLC特征图谱的建立

分别吸取参照物溶液与待测样品溶液10μL，注入高效液相色谱仪，采集110分钟内的特征图谱；

色谱条件为：色谱柱为十八烷基键合硅胶色谱柱；紫外检测器，检测波长为203nm；流动相A为乙腈，流动相B为0.09-0.11％磷酸水溶液；梯度洗脱；流速为0.8-1.0mL/min；柱温25-35℃；