[发明专利]一种利用HPLC-MS/MS同时检测5种大麻酚化合物的方法

说明书

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种利用高效液相色谱‑串联质谱法(HPLC‑MS/MS)同时检测5种大麻酚化合物的方法。所述方法采用大麻酚专用色谱柱，以甲酸水溶液为流动相A、乙腈为流动相B进行梯度洗脱，进入检测器检测；所述大麻酚类化合物为四氢大麻酚酸(THCA)、大麻二酚酸(CBDA)、大麻酚(CBN)、大麻二酚(CBD)和^△9‑四氢大麻酚(THC)。本发明的方法检测灵敏度高、回收率好，易于操作。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种利用高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时检测5种大麻酚化合物的方法。

背景技术

大麻中主要的功效成分为大麻酚类物质，其中四氢大麻酚酸(THCA)、大麻二酚酸(CBDA)、大麻酚(CBN)、大麻二酚(CBD)、^△9-四氢大麻酚(THC)这5种含量较多，应用最广泛。

据文献报道，大麻二酚是目前应用前景最广泛的大麻提取物，是一种淡黄色树脂或结晶，在医学上对癫痫、癌症，多发性硬化症等多种疾病有明显的治疗效果。^△9-四氢大麻酚在吸食或口服后对中枢神经的作用最强，且能与大麻酚和大麻二酚进行相互转化，因此需要严格控制。由于大麻中含有^△9-四氢大麻酚，曾一度受到世界范围内的严格管制。因此对四氢大麻酚酸(THCA)、大麻二酚酸(CBDA)、大麻酚(CBN)、大麻二酚(CBD)、^△9-四氢大麻酚这五种物质的检测有助于开发评估大麻的基础性研究。

2018年6月25日，美国FDA首次批准了由大麻种提取的活性成分组成的药物Epidiolex，用于治疗两岁以上儿童罕见的癫痫病。2016年全球合法大麻市场价值143亿美元。随着2018年10月17日，加拿大宣布大麻合法化后，大麻市场飞快增长，大量大麻添加食品应运而生。2019年10月17日起，加拿大更是宣布允许在休闲食品中加入大麻，大麻饼干、大麻饮料、大麻零食将在各种各样的渠道销售，实体店、线上店、超市甚至餐厅里，人们都可以轻松方便地接触到大麻食品。预计到2024年，大麻的全球销售额将达到635亿美元。目前我国海关发现有从加拿大走私的大麻添加到巧克力中，但是由于含量较低，同时缺乏相应的检测方法，造成执法困难。因此急需开发相应的检测方法应对进口执法的困难。

专利号为“CN107589203”，发明名称为“一种利用SPE-HPLC同时检测汉麻中三种大麻酚类化合物的方法”的专利，提供了一种基于固相萃取-高效液相色谱法来检测汉麻中三种大麻酚类化合物的方法，并对其进行定性定量分析。被检测的三种大麻酚类化合物为CBD、CBN和THC，不包含THCA和CBDA。此外，目前还未有文献资料和专利文件记载可以检测休闲食品中大麻酚类物质。

发明内容

有鉴于此，本发明以同时检测5种大麻酚类化合物的方法为核心，包含两个子发明(即A发明和B发明)，以及基于这两个发明的各自拓展。

本发明的目的之一在于提供一种检测方法，可以同时检测巧克力中5种大麻酚化合物。具体技术方案如下。

一种利用HPLC-MS/MS同时检测5种大麻酚类化合物的方法，所述方法采用大麻酚专用色谱柱，以甲酸水溶液为流动相A、乙腈为流动相B进行梯度洗脱，样品进入检测器检测；所述大麻酚类化合物为四氢大麻酚酸(THCA)、大麻二酚酸(CBDA)、大麻酚(CBN)、大麻二酚(CBD)和^△9-四氢大麻酚(THC)。

HPLC-MS/MS，即高效液相色谱-串联质谱法联用，是以高效液相色谱为分离手段，以质谱为鉴定工具的一种分离分析技术。HPLC方法在针对复杂样品进行分析时会受到一定要求的限制。而HPLC-MS/MS联用可以实现对复杂样品进行有效分离、定性和定量分析。

进一步，所述甲酸水溶液的质量浓度为0.1％-0.5％。

进一步，所述甲酸水溶液的质量浓度为0.1％、0.2％、0.3％、0.4％或0.5％。