[发明专利]一种检测OTA的核酸探针、血糖仪生物传感器、制备方法、检测方法和用途

权利要求书

1.一种检测OTA的核酸探针，其特征是，核酸探针的序列为SEQ ID NO：1，其5’端修饰有生物素。

2.一种检测OTA的血糖仪生物传感器，其特征是，包括：

如权利要求1所述的检测OTA的核酸探针，通过生物素固定在磁珠表面；

核酶链，序列为SEQ ID NO：2；

底物链，序列为SEQ ID NO：3，其5’端修饰有生物素，通过生物素固定在磁珠表面，3’端修饰有巯基，通过巯基连接有蔗糖转化酶。

3.一种如权利要求2所述的检测OTA的血糖仪生物传感器的制备方法，其特征是，包括如下步骤，

1)将底物链通过化学修饰连接上蔗糖转化酶；

2)将核酸探针与核酶链退火杂交，形成核酸探针-核酶链复合物；

3)将核酸探针-核酶链复合物与底物链混合，核酸探针-核酶链复合物与底物链分别固定在磁珠表面，形成检测OTA的血糖仪生物传感器。

4.如权利要求3所述的检测OTA的血糖仪生物传感器的制备方法，其特征是，步骤1)的操作步骤为，

将底物链、缓冲液和三(2-羧乙基)膦盐酸盐溶液混合，孵育，离心，清洗；

将sulfo-SMCC溶液和蔗糖转化酶混合，孵育，离心，清洗；

将清洗完后的底物链和蔗糖转化酶混合，孵育，离心，清洗，最后分散，底物链通过化学修饰连接上蔗糖转化酶。

5.如权利要求4所述的检测OTA的血糖仪生物传感器的制备方法，其特征是，底物链、缓冲液和三(2-羧乙基)膦盐酸盐溶液混合，孵育，离心，清洗步骤中，缓冲液为pH值为5.5的磷酸盐缓冲液A，清洗用的溶液为含有磷酸盐和氯化钠的缓冲液B。

6.如权利要求3-5任一项所述的检测OTA的血糖仪生物传感器的制备方法，其特征是，所述核酸探针-核酶链复合物的制备步骤为，将核酸探针和核酶链混合，在95℃下退火。

7.如权利要求3-5任一项所述的检测OTA的血糖仪生物传感器的制备方法，其特征是，所述步骤3)的操作步骤为，将亲和素包被磁珠磁性分离后，清洗，分散在缓冲液中，得到磁珠溶液；然后将核酸探针-核酶链复合物和连接有蔗糖转化酶的底物链混合，加入磁珠溶液中，孵育，清洗，分散，得到检测OTA的血糖仪生物传感器。

8.如权利要求7所述的检测OTA的血糖仪生物传感器的制备方法，其特征是，亲和素包被磁珠磁性分离后，清洗，分散在缓冲液中，得到磁珠溶液步骤中，所述缓冲液含有Tris、氯化钠和Tween-20，pH值为7.3。

9.一种采用如权利要求2所述的血糖仪生物传感器检测OTA的检测方法，其特征是，包括如下步骤，将检测OTA的血糖仪生物传感器磁性分离，弃去上清，加入待检测溶液和含有锌离子的缓冲液，孵育，磁性分离，然后去上清液和蔗糖溶液混合，孵育，最后取反应产物用血糖仪检测，确定待检测溶液中是否含有OTA以及OTA的含量。

10.一种如权利要求2所述的血糖仪生物传感器在检测OTA方面的用途。