[发明专利]一种基于高效液相色谱法检测Fmoc-Ser(tbu)-OH有关物质的方法在审
申请号: | 202110151161.0 | 申请日: | 2021-02-03 |
公开(公告)号: | CN112946130A | 公开(公告)日: | 2021-06-11 |
发明(设计)人: | 朱莉;徐红岩;闫峰;秦丽星;朱银 | 申请(专利权)人: | 江苏沿海化学品检测技术服务有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 上海浙晟知识产权代理事务所(普通合伙) 31345 | 代理人: | 杨小双 |
地址: | 224000 江苏省盐*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 高效 色谱 检测 fmoc ser tbu oh 有关 物质 方法 | ||
1.一种基于高效液相色谱法检测Fmoc-Ser(tbu)-OH有关物质的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
将水和0.1%TFA的离子对溶液按一定比例配置流动相A;
将乙腈和0.1%TFA的离子对溶液按一定比例配置流动相B;
注入待测溶液,以流动相A和流动相B对色谱柱进行梯度洗脱,所述梯度比例为:
0~20min,流动相B的体积变化为50~100;
20~25min,流动相B的体积变化为100;
25~26min,流动相B的体积变化为100~50;
26~32min,流动相B的体积为50;
记录色谱图,并采用面积归一化法计算Fmoc-Ser(tbu)-OH的纯度。
2.根据权利要求1所述的一种基于高效液相色谱法检测Fmoc-Ser(tbu)-OH有关物质的方法,其特征在于:所述0.1%TFA的离子对溶液的体积含量为0.02~1.5%、乙腈的体积含量为10~100%,水的体积含量为体积含量为0~90%。
3.根据权利要求2所述的一种基于高效液相色谱法检测Fmoc-Ser(tbu)-OH有关物质的方法,其特征在于:所用色谱柱包括Kromasil 100A C18 5u 250*4.6mm、SinoChrom ODS-BP5μ 4.6mmx250mm或Symmetry Shield RP18 5um 4.6*250mm中的任意一种。
4.根据权利要求3所述的一种基于高效液相色谱法检测Fmoc-Ser(tbu)-OH有关物质的方法,其特征在于:所用的色谱柱的固定相为十八烷基硅烷。
5.根据权利要求4所述的一种基于高效液相色谱法检测Fmoc-Ser(tbu)-OH有关物质的方法,其特征在于:所述梯度洗脱的柱温为20~50℃。
6.根据权利要求1至5所述的任意一种基于高效液相色谱法检测Fmoc-Ser(tbu)-OH有关物质的方法,其特征在于:所述梯度洗脱的进样浓度控制在0.25~1.5mg/ml。
7.根据权利要求6所述的一种基于高效液相色谱法检测Fmoc-Ser(tbu)-OH有关物质的方法,其特征在于:所述梯度洗脱时紫外线检测器的检测波长为210~240nm。
8.根据权利要求7所述的一种基于高效液相色谱法检测Fmoc-Ser(tbu)-OH有关物质的方法,其特征在于:所述梯度洗脱时紫外线检测器的检测波长为220nm。
9.根据权利要求8所述的一种基于高效液相色谱法检测Fmoc-Ser(tbu)-OH有关物质的方法,其特征在于:所述梯度洗脱时流动相流速为0.5~1.5ml/min。
10.根据权利要求9所述的一种基于高效液相色谱法检测Fmoc-Ser(tbu)-OH有关物质的方法,其特征在于:所述梯度洗脱时流动相流速为1ml/min。
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