[发明专利]一种河豚毒素提取纯化方法在审
| 申请号： | 202110151165.9 | 申请日： | 2021-02-03 |
| 公开（公告）号： | CN112920192A | 公开（公告）日： | 2021-06-08 |
| 发明（设计）人： | 宋江 | 申请（专利权）人： | 宋江 |
| 主分类号： | C07D491/18 | 分类号： | C07D491/18 |
| 代理公司： | 南昌华成联合知识产权代理事务所(普通合伙) 36126 | 代理人： | 徐苍 |
| 地址： | 341300 江西*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 河豚毒素 提取 纯化 方法 | ||
1.一种河豚毒素提取纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤S1：将河豚鱼内脏捣碎并与提取剂混匀，经超声提取后得到提取液；
步骤S2：将所述提取液经浓缩、脱色纯化制得浓缩液；
步骤S3：采用离子交换树脂柱对浓缩液进行初步纯化制得初次纯化液；
步骤S4：吸附膜处理所述初次纯化液并对所述吸附膜进行洗脱收集洗脱液制得河豚毒素粗品；
步骤S5：将所述河豚毒素粗品重结晶后制得河豚毒素。
2.根据权利要求1所述的河豚毒素提取纯化方法，其特征在于，步骤S4中，所述吸附膜的表面具有酰胺基和/或羧基。
3.根据权利要求2所述的河豚毒素提取纯化方法，其特征在于，步骤S4中，所述吸附膜为聚酰胺膜。
4.根据权利要求1-3任一项所述的河豚毒素提取纯化方法，其特征在于，步骤S4中，采用醋酸-丙酮-甲醇-水体系溶液对吸附膜进行洗脱。
5.根据权利要求1-4任一项所述的河豚毒素提取纯化方法，其特征在于，步骤S4中，所述洗脱重复三次，混合三次洗脱液制得河豚毒素粗品。
6.根据权利要求1-4任一项所述的河豚毒素提取纯化方法，其特征在于，步骤S4中，所述吸附膜处理在20-34℃条件下进行。
7.根据权利要求1所述的河豚毒素提取纯化方法，其特征在于，步骤S1中，所述提取剂以0.1-0.5％的乙酸作为辅助剂、乙酸乙醇为溶剂。
8.根据权利要求1所述的河豚毒素提取纯化方法，其特征在于，步骤S1中，所述超声提取的液料质量比为3:(0.8-1.2)、超声温度为34-38℃、超声功率62-70W、超声提取时间为20-120min。
9.根据权利要求1所述的河豚毒素提取纯化方法，其特征在于，步骤S5包括以下步骤：
步骤S501：蒸馏所述河豚毒素粗品得到余液，调pH值至8.5-9.5，10-16℃静置得到河豚毒素结晶体；
步骤S502：将所述河豚毒素结晶体溶于醋酸-丙酮-甲醇-水体系溶液，利用氨水调pH至8.5-9.5后进行冷冻干燥再次结晶纯化，结晶产物干燥后制得河豚毒素。
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