[发明专利]一种河豚毒素提取纯化方法

说明书

本发明涉及河豚毒素提取技术领域，提出一种河豚毒素提取纯化方法。上述河豚毒素提取纯化方法，包括以下步骤：将河豚鱼内脏捣碎并与提取剂混匀，经超声提取后得到提取液；将提取液经浓缩、脱色纯化制得浓缩液；采用离子交换树脂柱对浓缩液进行初步纯化制得初次纯化液；吸附膜处理初次纯化液并对吸附膜进行洗脱收集洗脱液制得河豚毒素粗品；将河豚毒素粗品重结晶后制得河豚毒素。上述河豚毒素提取纯化方法利用吸附膜实现对羟基的选择吸附，再通过洗脱、重结晶纯化制得河豚毒素。上述方法工艺简单、条件温和、制得的肝素钠纯度高。

技术领域

本发明涉及河豚毒素提取技术领域，具体而言，涉及一种河豚毒素提取纯化方法。

背景技术

河豚毒素是一种剧毒的天然神经毒素，具有重要的药用价值。河豚毒素可作镇痛剂，其镇痛作用比普鲁卡因和可卡因强10万倍，因此，可以用河豚毒素针剂代替吗啡、杜冷丁和阿片类药物，用于治疗各种类型的疼痛。除此之外，河豚毒素还具有局部麻醉、抗心率失常、降血压、抗肿瘤、戒毒等方面具有医学作用。

河豚毒素制备多采用提取纯化的方式进行，在目前的实际操作中河豚毒素的纯化主要结合过滤、蒸馏、吸附、层析和重结晶等技术实现。但是传统的钝化工艺流程长、过程复杂，耗时、高成本、成品纯度不高等缺陷。

发明内容

本发明的目的在于提供一种河豚毒素提取纯化方法，上述方法利用吸附膜实现对羟基的选择吸附，再通过洗脱、重结晶纯化制得河豚毒素。上述方法工艺简单、条件温和、制得的肝素钠纯度高。

本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现。

本发明提出一种河豚毒素提取纯化方法，其包括以下步骤：

步骤S1：将河豚鱼内脏捣碎并与提取剂混匀，经超声提取后得到提取液；

步骤S2：将提取液经浓缩、脱色纯化后制得浓缩液；

步骤S3：采用离子交换树脂柱对浓缩液进行初步纯化制得初次纯化液；

步骤S4：吸附膜处理初次纯化液并对吸附膜进行洗脱收集洗脱液制得河豚毒素粗品；

步骤S5：将河豚毒素粗品重结晶后制得河豚毒素。

本发明实施例的河豚毒素提取纯化方法的有益效果是：利用吸附膜实现对羟基的选择吸附，再通过洗脱、重结晶纯化制得河豚毒素。上述方法工艺简单、条件温和、制得的肝素钠纯度高。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

孔径大、特异性好、价格低廉的离子交换树脂柱对浓缩液进行初步纯化能够有效除去溶液中的大分子杂质，不仅能防止后续吸附膜处理过程中堵塞吸附膜，同时能够有效提高浓缩液的纯度。

酰胺基、羧基可与羟基形成氢键吸附，上述氢键的形成能够吸附到较为精准的物质。以表面还有上述基团的膜作为吸附膜，能够提高了河豚毒素的提取和纯化效率和精度。

下面对本发明实施例的一种河豚毒素提取纯化方法进行具体说明。

本发明提供了一种河豚毒素提取纯化方法，包括以下步骤：

步骤S1：将河豚鱼内脏捣碎并与提取剂混匀，经超声提取后得到提取液；将河豚鱼内脏捣碎后进行超声提取，上述提取方式效果好、安全、环保。

进一步地，在本发明较佳实施例中，上述提取剂以0.1-0.5％的乙酸作为辅助剂、乙酸乙醇为溶剂。