[发明专利]一种全血核酸提取用裂解结合液及其试剂盒和应用

权利要求书

1.一种全血核酸提取用裂解结合液，其特征在于，所述裂解结合液由以下物质组成：盐酸胍，碘化钠，EDTA，表面活性剂，Tris-HCl，SDS，NP-40，水。

2.根据权利要求1所述的全血核酸提取用裂解结合液，其特征在于，所述裂解结合液由以下物质组成：2-5M盐酸胍，0.5-2M碘化钠，5-20mM EDTA，0.1-1M Tris-HCl，表面活性剂20-30％，NP-40 1-2％，SDS 0.1-0.5％，余量为水，所述表面活性剂为TritonX-100或/和Tween-20。

3.根据权利要求1或2所述的全血核酸提取用裂解结合液，其特征在于，所述裂解结合液还包括3％-8％磁珠。

4.根据权利要求3所述的全血核酸提取用裂解结液，其特征在于，所述裂解结合液由以下物质组成：3M盐酸胍，0.5M碘化钠，15mM EDTA，10％TritonX-100，10％Tween20，0.2MTris-HCl，5％磁珠，0.1％SDS，1％NP-40，余量为水。

5.权利要求1～4任意项所述的全血核酸提取用裂解结合液在制备核酸提取的试剂或试剂盒中的应用。

6.含有权利要求1～4任意项所述的全血核酸提取用裂解结合液的全血核酸提取试剂盒，其特征在于，所述全血核酸提取试剂盒包括裂解结合液、蛋白酶K溶液、洗涤缓冲液和洗脱缓冲液。

7.根据权利要求6所述的全血核酸提取试剂盒，其特征在于，洗涤缓冲液包括洗涤缓冲液1和洗涤缓冲液2，洗涤缓冲液1由以下组分组成：1-3M盐酸胍，0.1-1M NaAc，pH值6.0-6.5，30-60％乙醇溶液；洗涤缓冲液2为70-85％乙醇水溶液。

8.根据权利要求6或7所述的全血核酸提取试剂盒，其特征在于，洗脱缓冲液由以下组分组成：1-5mM EDTA,5-20mM Tris-HCl,pH值7.5-8。

9.使用权利要求6～9任意项全血核酸提取试剂盒提取全血核酸的提取方法，其特征在于，提取方法的具体步骤如下：

1)在生物样品中加入裂解结合液，在20-85℃裂解5-15min，生物样品释放出核酸，在裂解结合液下与磁珠结合，在外部磁场作用下，磁珠聚集，形成磁珠-核酸复合物，收集磁珠-核酸复合物；

2)向磁珠-核酸复合物中加入洗涤缓冲液，洗涤去除磁珠-核酸复合物上的杂质，在外部磁场作用下，收集洗涤后的磁珠-核酸复合物；

3)向洗涤后的磁珠-核酸复合物中加入洗脱缓冲液，55℃-85℃洗脱3-8min可将结合在磁珠上的核酸洗脱下来，即得到提取的核酸。

10.根据权利要求3所述的提取方法，其特征在于，所述生物样品包括组织、细胞、全血、血浆、血清、体液、拭子洗液。