[发明专利]一种CHI3L1/LN检测卡、其制备方法和应用

权利要求书

1.一种CHI3L1/LN检测卡，其特征在于，包括：

底衬；作为所述CHI3L1/LN检测卡的基底；

包被膜；设置于所述底衬上表面的中部；

结合垫：搭接设置于所述包被膜的上表面的一端；

样品垫；搭接设置于所述结合垫的上表面的一端；

吸水纸；搭接设置于所述包被膜的上表面的另一端；

其中，所述结合垫喷涂有微球线，所述微球线为稀土纳米探针标记的LN抗体1、CHI3L1抗体1、兔IgG抗体；所述包被膜上依次设置有检测线和质控线，所述检测线靠近所述结合垫；所述检测线包被有LN抗体2、CHI3L1抗体2，质控线包被有羊抗兔IgG抗体。

2.根据权利要求1所述的CHI3L1/LN检测卡，其特征在于，所述稀土纳米探针为核壳结构氟化铒钠包覆氟化钇钠，其组成为：NaErF₄@NaYF₄；

其中，NaErF₄为全铒掺杂核结构；NaYF₄为壳层，@表示NaYF₄包覆在NaErF₄表面。

3.根据权利要求2所述的CHI3L1/LN检测卡，其特征在于，所述稀土纳米探针在基态下稳定，在808nm的激发光源作用下发射出波长范围在500-550nm，640-680nm和1500-1600nm的三发射荧光。

4.根据权利要求1所述的CHI3L1/LN检测卡，其特征在于，所述稀土纳米探针的制备活化方法，包括以下步骤：

步骤一：合成氟化铒钠核结构：在容器中，加入油酸、1-十八烯、铒的硝酸盐或醋酸盐或氯化物、NaOH和氟化铵甲醇混合溶液，并进行反应；随后用环己烷乙醇混合液洗涤，分散于环己烷中，得到NaErF₄纳米探针环己烷溶液；

步骤二：制备核壳结构稀土纳米探针：在容器中，加入油酸、1-十八烯、醋酸钇、NaOH和氟化铵甲醇混合溶液、NaErF₄纳米探针环己烷溶液，并进行反应，用环己烷乙醇混合液洗涤3～4次，分散于环己烷中；用酸洗法将探针转移至水相，再在探针表面修饰羧基，得到水溶性NaErF₄@NaYF4稀土纳米探针；

步骤三：活化稀土纳米探针：对步骤二的稀土纳米探针进行超声波处理和离心处理，对沉淀物用10～100mM，pH为5.0～7.0的MES溶液洗涤；加入碳二亚胺、N-羟基硫代琥珀酰亚胺，混匀后高速离心，对沉淀物用pH为5.0～7.0的MES溶液洗涤，即得到活化稀土纳米探针。

5.根据权利要求1所述的CHI3L1/LN检测卡，其特征在于，所述结合垫上喷涂的稀土纳米探针标记的LN、CHI3L1、兔IgG抗体的含量为50～200μg抗体/200μl荧光微球。

6.根据权利要求1所述的CHI3L1/LN检测卡，其特征在于，所述检测线中LN抗体2和CHI3L1抗体2包被浓度为0.1～2mg/ml、用量为0.5～1.5μl包被液量/cm膜，所述质控线中羊抗兔IgG抗体包被浓度为0.5～2mg/ml、用量为0.5～1.5μl包被液量/cm膜。