[发明专利]一种CHI3L1/LN检测卡、其制备方法和应用在审

专利信息
申请号: 202110155298.3 申请日: 2021-02-04
公开(公告)号: CN112730835A 公开(公告)日: 2021-04-30
发明(设计)人: 张云;张肖;宋良;刘宁 申请(专利权)人: 厦门稀土材料研究所
主分类号: G01N33/573 分类号: G01N33/573;G01N33/558;G01N33/58;G01N33/533;G01N33/531;C09K11/02;C09K11/85
代理公司: 常州易瑞智新专利代理事务所(普通合伙) 32338 代理人: 徐琳淞
地址: 361000 福建*** 国省代码: 福建;35
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摘要:
搜索关键词: 一种 chi3l1 ln 检测 制备 方法 应用
【说明书】:

发明公开了一种CHI3L1/LN检测卡、其制备方法和应用,属于纳米材料和纳米医学领域,其中所述采用的稀土纳米探针为核壳结构氟化铒钠包覆氟化钇钠,粒径为20nm~30nm,其组成为:NaErF4@NaYF4,其中,NaErF4为全铒掺杂核结构;NaYF4为壳层,@表示NaYF4包覆在NaErF4表面。本发明的纳米探针为稀土氟化物纳米材料具有背景低,发光寿命长,荧光信号强,信噪比高等优势,标记通过共价键将探针与抗体连接,标记产物稳定,具有灵敏度高、准确度高、检测快速简便等特点,可辅助医生判断患者在早期是否肝纤维化。

技术领域

本发明属于纳米材料和纳米医学领域,尤其是一种CHI3L1/LN检测卡、其制备方法和应用。

背景技术

肝癌(HCC)是最常见的恶性肿瘤之一,同时也是排列全球第三位的肿瘤相关致死原因。其发病率在我国仅次于肺癌,居第二位。我国每年约33万人死于肝癌,病死率高。肝癌中>70%的人合并有肝硬化,而肝硬化患者有50%左右可进展为肝癌。肝纤维化导致的肝硬化被定义为肝纤维化的晚期阶段,由肝纤维化发展至肝硬化是一个连续的动态发展过程,且肝纤维化和早期肝硬化是可逆的,因此,早期发现肝纤维化并及时治疗,将肝纤维化控制在可逆阶段,至关重要。

CHI3L1基因位于人类染色体1q32.1,包含7948个碱基和10个外显子,其序列高度保守。CHI3L1为糖基水解酶家族成员之一,能结合壳多糖,但无壳多糖的活性,在炎症和组织重塑中起重要作用。CHI3L1在肝纤维化进展中具有多重角色:激活星状细胞的活化与增殖,参与纤维化细胞的形成;其催化区域能和IL-13Rα2的胞外区域特异性地结合,调节部分细胞反应,促进胶原蛋白等肝纤维化蛋白的产生;作为分泌的细胞外基质蛋白的组成部分,参与纤维化的形成,同时,通过信号通路,形成正向反馈,加速纤维化的进程。

近年来,大量的研究表明:YKL-40是一种功能强大的纤维化标志物,具有较高的诊断准确性,尤其是在HCV相关肝病中。它的测定可证实和提高诊断准确性,尤其是在肝纤维化的早期阶段;并且YKL-40血清标志物可预测晚期纤维化和肝硬化。随着肝纤维化程度的加重而增加。

肝纤维化的形成包含了三个方面,分别是肝损伤因子、细胞因子改变、细胞外基质代谢异常并组织重建;而肝纤维的异常沉积的细胞外机制有常常包含了胶原蛋白(I、Ⅲ、Ⅳ、V、Ⅵ)、蛋白多糖(HA)、糖蛋白(FN、LN、VN等),因此当前认为具有诊断价值的指标为血清血清PCⅢ,HA,LN等。PCⅢ作为反应间质胶原合成的重要指标,其一个重要特点便可以在细胞外胶原纤维形成时或者形成以后依然保留着氨基酸的肽链,而随着胶原纤维的不断形成,这些没有被清除的肽段便开始脱离前胶原,并且以游离片段的形势出现在外周血中,并随着胶原纤维合成的活跃而不断增多。因此可以认为PCⅢ跟肝纤维化的活动存在密切相关性,并且在肝纤维化胶原合成时,早期主要主要为Ⅲ型。HA作为ECM中最重要的糖胺多糖成分,在肝纤维化早期,血清中的HA呈现出显著增加。HA不仅可以当作是反映肝纤维化的敏感指标,而且还能够直接反映肝功能的损伤程度

因此,将CHI3L1、LN、HA、PCⅢ等其他血清肝纤维化指标进行联合检测可提高肝纤维诊断的准确性和可靠性。现有技术中肝纤维化标志物仅针对单一的指标有LN、CHI3L1,检测方法主要有免疫比浊法、荧光免疫层析法、胶体金法等。其中胶体金法具有操作简单快速的优点,但灵敏度低且定量不准确;免疫比浊法较为敏感、准确,可应用于全自动生化仪,但需要仪器且耗时较长,适合处理大量样本,无法满足快速检测的目的;免疫荧光法是将抗体共价结合于荧光微球表面活性基团上,通过激发后检测线是否产生荧光来判断结果,快速便捷可准确定量同时具有高灵敏度、标记物稳定等优点,在医学免疫检测领域广泛应用。

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