[发明专利]一种高硫氧化性能脱硫菌株的选育方法及其应用有效
申请号: | 202110157283.0 | 申请日: | 2021-02-04 |
公开(公告)号: | CN112779191B | 公开(公告)日: | 2022-11-15 |
发明(设计)人: | 穆廷桢;邢建民;杨茂华;苗得露;赵胥浩 | 申请(专利权)人: | 中国科学院过程工程研究所 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/02;C12R1/01 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 巩克栋 |
地址: | 100190 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 氧化 性能 脱硫 菌株 选育 方法 及其 应用 | ||
1.一种高硫氧化性能脱硫菌株,其特征在于,所述高硫氧化性能脱硫菌株的选育方法包括如下步骤:
(1)将野生脱硫菌Thioalkalivibrio在100-200rpm、28-32℃下TD培养基中进行28-32h培养后,低速离心去除硫颗粒,上清液再次离心收集细菌,洗涤细菌,调整细菌密度得到菌液,菌液涂布于含硫化物的固体培养基上进行等离子体处理,处理后的培养皿进行培养;等离子体处理的工作电压为1-10V,电流为0.1-1.0A,处理时间为1-10min,调节电极的位置,使上下电极之间的距离为2.5-3.5mm;所述野生脱硫菌的保藏编号为CGMCC No.8497;
(2)挑选单一的、形态完整的菌落分别接种于TDS液体培养基和TD液体培养基中,震荡培养,记录OD值,以野生脱硫菌作为对照,选择两种模式下OD值均比野生脱硫菌高的菌液相应的克隆作为疑似菌株;
(3)将步骤(2)筛选的疑似菌株分别接种于梯度硫化物浓度液体培养基中进行培养,以野生脱硫菌作为对照,测定液体中硫化物的含量变化;将步骤(2)筛选的疑似菌株进行洗涤,然后进行生物硫氧化性能测定,以野生脱硫菌作为对照;综合上述测定结果,筛选出所述高硫氧化性能脱硫菌株;
所述TDS液体培养基的配方为:在1L水中,含有Na2CO3 46g、NaHCO3 23g、KNO3 0.505g、K2HPO4·3H2O 2g、NH4Cl 0.268g、MgCl2 0.1g、Trace 2mL,Na2S·9H2O,pH自然;
所述TD液体培养基的配方为:在1L水中,含有Na2CO3 46g、NaHCO3 23g、Na2S2O3·5H2O19.82g、KNO3 0.505g、K2HPO4·3H2O 2g、NH4Cl 0.268g、MgCl20.1g、Trace 2mL,pH自然。
2.如权利要求1所述的高硫氧化性能脱硫菌株,其特征在于,步骤(1)所述野生脱硫菌菌液中细菌密度为104-106cfu/mL。
3.如权利要求1所述的高硫氧化性能脱硫菌株,其特征在于,所述低速离心的速率为800-1200rpm,时间为1-3min。
4.如权利要求1所述的高硫氧化性能脱硫菌株,其特征在于,所述再次离心的速率为7000-9000rpm,时间为3-7min。
5.如权利要求1所述的高硫氧化性能脱硫菌株,其特征在于,步骤(1)所述处理后的培养皿进行培养在28-32℃下进行7天。
6.如权利要求1所述的高硫氧化性能脱硫菌株,其特征在于,步骤(2)所述震荡培养在28-32℃下进行20-80h。
7.如权利要求1所述的高硫氧化性能脱硫菌株,其特征在于,步骤(2)所述OD值在600nm处测定。
8.如权利要求1所述的高硫氧化性能脱硫菌株,其特征在于,步骤(3)所述硫化物浓度梯度范围为10-150mmol/L。
9.如权利要求1所述的高硫氧化性能脱硫菌株,其特征在于,步骤(3)所述疑似菌株在接种前在150-180rpm、28-32℃下培养65-75h。
10.如权利要求1所述的高硫氧化性能脱硫菌株,其特征在于,步骤(3)所述生物硫氧化性能测定的方法为呼吸测定。
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