[发明专利]一种高硫氧化性能脱硫菌株的选育方法及其应用

说明书

本发明涉及一种高硫氧化性能脱硫菌株的选育方法及其应用，该选育方法基于等离子体处理技术，并以高硫化物条件为筛选压力，利用梯度硫化物浓度的平板，选择得到多个完整的菌落，通过高浓度硫化物的培养，考察各菌株硫氧化性能的变化，并通过呼吸测定方法测定细胞硫氧化性能，最后筛选出一株目的菌株。该选育方法能够选育出脱硫性能好，处理效率高的菌株，与野生菌株对比表明，选育出的菌株的硫氧化性能提高，硫酸根积累显著降低，单质硫生成率提高，使得系统能耗低，运行成本低，有力的促进生物脱硫的深入推广，增强了生物脱硫的鲁棒性，为生物脱硫技术应对实际应用中气体成分复杂多变的问题提供了非常有价值的思路。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种高硫氧化性能脱硫菌株的选育方法及其应用。

背景技术

生物脱硫是在常温常压下利用具有硫氧化性能的微生物将水中的硫化物去除的技术。利用此法可以将天然气、沼气中的H₂S除去。生物脱硫工艺的脱硫能力往往和硫氧化微生物的脱硫性能有直接关系，此外，在实际情况中，生产条件的变化使得气体中硫化氢的含量出现波动性变化，一旦遇到硫化氢情况，极有可能对脱硫系统造成一定的冲击，影响生产的正常运行。因此，高性能的菌株可以有效降低意外情况的风险，同时还可以提高系统运行的稳定性，降低系统运行成本，对推进生物脱硫的工业应用有重要意义。

例如CN107881189A公开了一种有效提高嗜酸性氧化亚铁硫杆菌硫氧化能力的方法，是以如下方式实现：(1)构建重组菌A.ferrooxidans，实现增加酰基高丝氨酸内酯合成酶基因的拷贝数，通过过表达afeI基因增加酰基高丝氨酸内酯(AHL)的含量，达到提高A.ferrooxidans的硫氧化能力；或(2)在野生型A.ferrooxidans培养过程中，添加5.4×10³～10×10³mg/mL量外源的酰基高丝氨酸内酯(AHL)，通过增加AHL含量达到提高A.ferrooxidans的硫氧化能力。

又例如CN111996134A公开了一种嗜盐嗜碱性硫氧化复合菌剂及其制备方法和在生物脱硫中的应用，所述嗜盐嗜碱性硫氧化复合菌剂包括硫碱弧菌、硫微螺菌和硫碱杆菌。本发明嗜盐嗜碱性硫氧化复合菌剂具有氧化硫化物生成单质硫的能力，单质硫产率能达到85％以上，硫化物的去除率达到99％以上；该嗜盐嗜碱性硫氧化复合菌剂能够更好地满足工业脱硫的需求，其单质硫生成率和硫化物脱除率等指标达到或超过单一菌株，可以拓展生物脱硫技术应用范围，增强应对复杂工况的能力，提高系统稳定性，强化脱硫效果。

但现有技术中具有高硫氧化性能的脱硫菌株还比较少，关于如何选育高硫氧化性能的脱硫菌株的策略也鲜少。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种高硫氧化性能脱硫菌株的选育方法及其应用。

为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种高硫氧化性能脱硫菌株的选育方法，所述选育方法包括如下步骤：

(1)将野生脱硫菌菌液涂布于含硫化物的固体培养基上进行等离子体处理，处理后的培养皿进行培养；

(2)挑选单一的、形态完整的菌落分别接种于TDS液体培养基和TD液体培养基中，震荡培养，记录OD值，以野生脱硫菌作为对照，选择两种模式下OD值均偏高的菌液相应的克隆作为疑似菌株；

(3)将步骤(2)筛选的疑似菌株分别接种于梯度硫化物浓度液体培养基中进行培养，以野生脱硫菌作为对照，测定液体中硫化物的含量变化；将步骤(2)筛选的疑似菌株进行洗涤，然后进行生物硫氧化性能测定，以野生脱硫菌作为对照；综合上述测定结果，筛选出所述高硫氧化性能脱硫菌株。