[发明专利]一种卵清多肽的制备方法

权利要求书

1.一种卵清多肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤，

前处理：将卵清蛋白稀释混匀调pH至酸性后离心沉淀，分离得到上清和沉淀；

上清处理：将所得上清进行酸性蛋白酶处理，得到酶处理液A；

沉淀处理：将所得沉淀进行碱性溶液溶解，再碱性蛋白酶处理，得到酶处理液B；

卵清多肽的获得：将所得酶处理液A和酶处理液B混合后调pH为6.5-8.5，再用中性蛋白酶处理得到组合处理液，再热处理分离出上清液，该上清液即为卵清多肽。

2.如权利要求1所述卵清多肽的制备方法，其特征在于，所述前处理是在生卵清液中加水稀释混匀，然后调pH至3-6；优选的pH为3.5-4.5，再打浆后静置，分离得到上清和沉淀；优选的，所述打浆后静置为：10000-20000转/分打浆2-5分钟后，再静置4-8小时。

3.如权利要求1或2所述卵清多肽的制备方法，其特征在于，所述前处理中稀释是将卵清蛋白用纯净水稀释2-6倍；优选稀释3-4倍。

4.如权利要求1至3任一所述卵清多肽的制备方法，其特征在于，所述前处理中预先将生卵清液在稀释前或稀释后加热至100℃保持1-15分钟；优选的5分钟，然后再打浆及处理。

5.如权利要求1所述卵清多肽的制备方法，其特征在于，所述上清处理步骤为，往上清中直接加入酸性蛋白酶至100-50000酶单位30-45℃保温4-24小时，优选的加入酸性蛋白酶至500-3000酶单位35-48℃保温8-16小时；得到酶处理液A。

6.如权利要求1所述卵清多肽的制备方法，其特征在于，所述沉淀处理步骤为，往所得沉淀中加入50mM pH9-11的碳酸钠-碳酸氢钠溶液，加入量按每克10-100ml的量，再加入碱性蛋白酶至100-50000酶单位36-55℃保温4-16小时；优选的，加入碱性蛋白酶至300-1000酶单位45-50℃保温8-10小时；得到酶处理液B。

7.如权利要求1所述卵清多肽的制备方法，其特征在于，所述卵清多肽的获得步骤为，将所得酶处理液A和酶处理液B混合后调pH为6.5-8.5，再用中性蛋白酶处理得到组合处理液，其中加中性蛋白酶至100-10000酶单位36-55℃保温2-16小时；优选的，加中性蛋白酶至500-1000酶单位42-50℃保温2-6小时,再加温至80-90℃并保持5-30分钟后进行分离处理，所得到的上清液即为卵清多肽。

8.如权利要求1所述卵清多肽的制备方法，其特征在于，所述卵清多肽的获得步骤中，酶处理液A和酶处理液B的混合液中两者的体积比例为1:(1-3)；优选的，体积比例为1：2。

9.如权利要求1所述卵清多肽的制备方法，其特征在于，还包括将由权利要求1-8任一所述制备方法制得的卵清多肽进一步用超滤器或分子筛分离出分子量在1-5KD的卵清多肽；优选的，将所得的卵清多肽用5KD截留膜的超滤器过滤卵清多肽，滤过液进一步用1KD截留膜的超滤器过滤至余液为滤前的1/3-1/5时收集截留液，便得浓缩的分子量在1-5KD的卵清多肽。

10.如权利要求1或9所述卵清多肽的制备方法，其特征在于，还包括将所得的卵清多肽或1-5KD的多肽混合物用磷酸盐缓冲液调配至pH为6-9，优选的pH为7-8，再罐装并经100-120℃灭菌5-30分钟后常温保存。

11.权利要求1-10任一所述制备方法制备得到的卵清多肽。