[发明专利]一种宫颈拭子核酸提取的裂解结合液、试剂盒及方法

权利要求书

1.一种宫颈拭子核酸提取的裂解结合液，其特征在于，所述裂解结合液由以下浓度的组分组成：

2％十二烷基磺酸钠、1％聚乙二醇辛基苯基醚、200mM 4-羟乙基哌嗪乙磺酸、10%氯化钠、100mM三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、1mM EDTA和2%月桂醇聚氧乙烯醚硫酸酯钠盐，所述裂解结合液的pH值保持在7.0-8.0。

2.一种宫颈拭子核酸提取的试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1所述的裂解结合液和磁珠溶液，所述磁珠溶液由磁珠和防腐剂混合而成，所述磁珠用于吸附DNA，所述磁珠溶液的浓度为200-400μg/ml。

3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述磁珠的用量为300μg/ml。

4.一种宫颈拭子核酸提取的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）在离心管中加入权利要求1所述的裂解结合液和磁珠溶液混匀，之后加入宫颈拭子样品，漩涡振荡混合均匀5-20s，之后在90℃水浴下静置1min，所述磁珠溶液和裂解结合液的体积比为1:30，宫颈拭子样品与裂解结合液的体积比为1:3；

（2）将步骤（1）的离心管从水浴中取出，静置，冷却至25℃以下；

（3）将步骤（2）中冷却完成的离心管涡旋5-15s，之后将离心管置于磁力架上，至磁珠全部吸附至离心管壁且离心管内液体澄清后，吸弃液体；

（4）移去磁力架，在离心管中加入DNA洗脱液，所述DNA洗脱液与宫颈拭子样品的体积比为1:2-5，用移液器吸头吹打或悬浮震荡管壁磁珠，直至离心管内液体分布均匀，收集离心管内的洗脱液体。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤（3）中，吸弃液体后，进行吸弃残留液体的步骤，吸弃残留液体的步骤为以下方式中的一种：

（1）离心管静置0.5-1min，残留液体沿离心管壁掉落到离心管底部，吸弃残留液体；

（2）离心管瞬时离心，然后将离心管放置到在磁力架，吸弃残留液体；

（3）敲打离心管，以使得离心管壁上的残留液体都掉落到底部，然后将离心管放置到在磁力架，吸弃残留液体。

6.如权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤（4）中，所述DNA洗脱液与宫颈拭子样品的体积比为1:4。

7.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述DNA洗脱液为去离子水、DEPC水或PCR混合反应液。