[发明专利]一种用于检测HLA-B*58:01基因的试剂盒及其方法有效
申请号: | 202110166818.0 | 申请日: | 2021-02-05 |
公开(公告)号: | CN112746095B | 公开(公告)日: | 2022-08-02 |
发明(设计)人: | 不公告发明人 | 申请(专利权)人: | 为朔医学数据科技(北京)有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6858 | 分类号: | C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人: | 陈秋梦 |
地址: | 100070 北京市丰台区外环西路*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 hla 58 01 基因 试剂盒 及其 方法 | ||
1.一种用于检测HLA-B*58:01基因的试剂盒,其特征在于,其包括核酸组合1;
所述核酸组合1由核苷酸序列如SEQ ID No.1~2所示的第一引物对和核苷酸序列如SEQID No.3所示的第一探针组成。
2.根据权利要求1所述的用于检测HLA-B*58:01基因的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括用于检测内参基因的核酸组合2;
所述核酸组合2由核苷酸序列如SEQ ID No.4~5所示的第二引物对和核苷酸序列如SEQID No.6所示探针2组成。
3.根据权利要求1~2任一项所述的用于检测HLA-B*58:01基因的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括PCR反应液。
4.根据权利要求1~2任一项所述的用于检测HLA-B*58:01基因的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括预处理试剂A和预处理试剂B;
所述预处理试剂A包括:蔗糖、Tris-HCl、MgCl2、Triton-X-100和水;
所述预处理试剂B包括:NaCl、Tris-HCL、NaOH、EDTA、SDS和水。
5.一种用于检测HLA-B*58:01基因的方法,其特征在于,所述方法包括采用如权利要求1~4任一项所述的用于检测HLA-B*58:01基因的试剂盒对待测样本进行qPCR检测;
所述方法不以疾病的诊断或检测为直接目的。
6.根据权利要求5所述的用于检测HLA-B*58:01基因的方法,其特征在于,所述待测样本为血液样本。
7.根据权利要求6所述的用于检测HLA-B*58:01基因的方法,其特征在于,在进行所述qPCR之前,所述方法包括:将所述血液样本与预处理试剂A混合,对混合产物进行离心,将去除上清液后的离心产物与预处理试剂B混合;
所述预处理试剂A包括:蔗糖、Tris-HCl、MgCl2、Triton-X-100和水;
所述预处理试剂B包括:NaCl、Tris-HCL、NaOH、EDTA、SDS和水。
8.根据权利要求7所述的用于检测HLA-B*58:01基因的方法,其特征在于,在所述血液样本与所述预处理试剂A混合后的溶液中,所述蔗糖的终浓度为200~400 mM,所述Tris-HCl的终浓度为1~20 mM,所述MgCl2的终浓度为1~10 mM,所述Triton-X-100的终浓度为1%~5%;
离心产物与预处理试剂B混合的溶液中,所述NaCl的终浓度为80~120 mM,所述Tris-HCL的终浓度为30~70 mM,所述NaOH的终浓度为30~70 mM,所述EDTA的终浓度为0.1~10 mM,所述SDS的终浓度为0.001~0.05%;
所述离心的转速为8000~12000 rpm,时间为0.5~3 min。
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