[发明专利]一种用于检测HLA-B*58:01基因的试剂盒及其方法有效

专利信息
申请号: 202110166818.0 申请日: 2021-02-05
公开(公告)号: CN112746095B 公开(公告)日: 2022-08-02
发明(设计)人: 不公告发明人 申请(专利权)人: 为朔医学数据科技(北京)有限公司
主分类号: C12Q1/6858 分类号: C12Q1/6858;C12N15/11
代理公司: 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 代理人: 陈秋梦
地址: 100070 北京市丰台区外环西路*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 用于 检测 hla 58 01 基因 试剂盒 及其 方法
【权利要求书】:

1.一种用于检测HLA-B*58:01基因的试剂盒,其特征在于,其包括核酸组合1;

所述核酸组合1由核苷酸序列如SEQ ID No.1~2所示的第一引物对和核苷酸序列如SEQID No.3所示的第一探针组成。

2.根据权利要求1所述的用于检测HLA-B*58:01基因的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括用于检测内参基因的核酸组合2;

所述核酸组合2由核苷酸序列如SEQ ID No.4~5所示的第二引物对和核苷酸序列如SEQID No.6所示探针2组成。

3.根据权利要求1~2任一项所述的用于检测HLA-B*58:01基因的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括PCR反应液。

4.根据权利要求1~2任一项所述的用于检测HLA-B*58:01基因的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括预处理试剂A和预处理试剂B;

所述预处理试剂A包括:蔗糖、Tris-HCl、MgCl2、Triton-X-100和水;

所述预处理试剂B包括:NaCl、Tris-HCL、NaOH、EDTA、SDS和水。

5.一种用于检测HLA-B*58:01基因的方法,其特征在于,所述方法包括采用如权利要求1~4任一项所述的用于检测HLA-B*58:01基因的试剂盒对待测样本进行qPCR检测;

所述方法不以疾病的诊断或检测为直接目的。

6.根据权利要求5所述的用于检测HLA-B*58:01基因的方法,其特征在于,所述待测样本为血液样本。

7.根据权利要求6所述的用于检测HLA-B*58:01基因的方法,其特征在于,在进行所述qPCR之前,所述方法包括:将所述血液样本与预处理试剂A混合,对混合产物进行离心,将去除上清液后的离心产物与预处理试剂B混合;

所述预处理试剂A包括:蔗糖、Tris-HCl、MgCl2、Triton-X-100和水;

所述预处理试剂B包括:NaCl、Tris-HCL、NaOH、EDTA、SDS和水。

8.根据权利要求7所述的用于检测HLA-B*58:01基因的方法,其特征在于,在所述血液样本与所述预处理试剂A混合后的溶液中,所述蔗糖的终浓度为200~400 mM,所述Tris-HCl的终浓度为1~20 mM,所述MgCl2的终浓度为1~10 mM,所述Triton-X-100的终浓度为1%~5%;

离心产物与预处理试剂B混合的溶液中,所述NaCl的终浓度为80~120 mM,所述Tris-HCL的终浓度为30~70 mM,所述NaOH的终浓度为30~70 mM,所述EDTA的终浓度为0.1~10 mM,所述SDS的终浓度为0.001~0.05%;

所述离心的转速为8000~12000 rpm,时间为0.5~3 min。

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