[发明专利]一种用于检测HLA-B*58:01基因的试剂盒及其方法

说明书

本发明公开了一种用于检测HLA‑B*58:01基因的试剂盒及其方法，涉及基因检测技术领域，该试剂盒包括核酸组合1；所述核酸组合1包括核苷酸序列如SEQ ID No.1～2所示的第一引物对。该引物对是针对HLA‑B*58:01基因的特异性位点、区域进行设计的，单个反应即可完成HLA‑B*58:01基因的有效检测，且检测的准确性高，大幅度降低了假阴性和假阳性结果的出现。

技术领域

本发明涉及基因检测技术领域，具体而言，涉及一种用于检测HLA-B*58:01基因的试剂盒及其方法。

背景技术

主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex，MHC)是一组编码动物主要组织相容性抗原的基因群的统称，人类的MHC被称为人类白细胞抗原(HumanLeukocyte Antigen，HLA)。HLA基因定位于人类第6号染色体短臂上，由一群密切连锁的复等位基因组成，包含约360万个碱基对，长约4MB，是当前已知的人类染色体中基因密度最高、多态性最为丰富的区域。HLA是细胞表面分子，主要参与T细胞活化的已加工过的抗原肽的呈递并在其中起重要作用，构成机体最重要的免疫系统之一。

HLA包含HLA-I、HLA-II和HLA-III，也称作MHC-I、MHC-II和MHC-III。HLA-I主要包括HLA-A、HLA-B、HLA-C，位于HLA复合体远离着丝粒的一端；HLA-II主要包括HLA-DR、HLA-DQ及HLA-DP，位于HLA复合体近着丝粒的一端；III类基因区位于二者之间。世界卫生组织HLA因子命名委员会命名的相关HLA等位基因已达到28000多个(2020.12)，在HLA-I和HLA-II等位基因家族中HLA-B的多态性最显著。HLA基因复合体不仅是多基因的而且是多等位基因的，HLA基因的多态性决定了在个体间可以产生高度多样化的HLA蛋白，也决定了不同个体处理和呈递同一种抗原的能力不同，从遗传水平上调控免疫应答功能，从而使不同个体对同一种抗原的免疫应答可表现出个体差异。这种个体差异或产生保护性免疫，或形成免疫耐受，或出现自身免疫倾向，或表现为HLA相关疾病。

药物不良反应(Adverse Drug Reaction，ADR)己经成为许多国家重要的致病甚至致死原因，皮肤不良反应是药物不良反应中的重要一部分，约占药物不良反应的三分之一。皮肤不良反应在临床上最常见的主要包括轻度的斑丘疹(MPE)、Stevens-Johnson综合征(SJS)、中毒性表皮坏死松懈症(TEN)。其中SJS和TEN是严重的皮肤和黏膜反应，可导致永久性残疾甚至致命，SJS致死率约为5％，TEN致死率则高达25～50％。皮肤不良反应大部分患者主要和以下这些药物相关：别嘌呤醇(Allopurinol)、卡马西平(Carbamazepine)、奥卡西平(Oxcarbazepine)、苯妥英(Phenytoin)、拉莫三嗪(Lamotrigine)、苯巴比妥(Phenobarbital)以及磺胺类抗菌素等。

研究表明，中国大陆高尿酸血症的患病率13.3％，患病人数已经超过1.2亿；中国大陆痛风的患病率为1.1％，患病人数已经超过1700万。别嘌呤醇(Allopurinol)为次黄嘌呤的异构体，是黄嘌呤氧化酶的抑制剂，主要用于阻止次黄嘌呤和黄嘌呤代谢为尿酸，从而减少尿酸的生成，是高尿酸血症和痛风患者降尿酸治疗的一线用药。

别嘌呤醇疗效显著、价格低廉，但在中国人群中使用时易发生别嘌醇超敏反应，研究表明中国台湾地区超敏反应发生率为2.7％，别嘌醇超敏反应一旦发生，致死率高达30％。研究表明，别嘌呤醇不良反应的发生与HLA-B*58:01存在明显相关性，而汉族人群携带HLA-B*58:01基因型的频率为10％～20％。HLA-B*58:01等位基因与别嘌呤醇引发的SJS或TEN的强相关性在中国(包括台湾和香港地区)、泰国、新加坡、韩国等国家地区的多个研究小组的汉族人群中得到证实。几乎所有副反应的患者都是HLA-B*58:01的携带者，而别嘌呤醇耐受者中只有15％左右的HLA-B*58:01携带者。国内外相关指南均指出，亚裔人群在使用别嘌呤醇之前应进行HLA-B*58:01基因检测，对于HLA-B*58:01阳性患者，均不推荐使用别嘌呤醇。