[发明专利]刀鲚性腺体细胞系的建立及其应用在审
申请号: | 202110172872.6 | 申请日: | 2021-02-08 |
公开(公告)号: | CN112852711A | 公开(公告)日: | 2021-05-28 |
发明(设计)人: | 李名友;仲颖;郭婧;阚宇婷;刘东 | 申请(专利权)人: | 上海海洋大学 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N5/076;C12R1/91 |
代理公司: | 上海唯智赢专利代理事务所(普通合伙) 31293 | 代理人: | 吴瑾瑜 |
地址: | 201306 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 性腺 体细胞 建立 及其 应用 | ||
1.刀鲚性腺体细胞系的建立方法,其特征在于,步骤包括:
(1)分离和消化刀鲚的性腺,取细胞铺板培养;
(2)细胞贴壁后进行传代,连续培养45-60代。
2.权利要求1所述刀鲚性腺体细胞系的建立方法,其特征在于,所述的刀鲚为长江刀鲚。
3.权利要求1所述刀鲚性腺体细胞系的建立方法,其特征在于,以含有羟乙基哌嗪乙硫磺酸的DMEM培养基为基础培养基,并含有胎牛血清、青鳉鱼胚胎提取物、海鲈鱼血清、碱性成纤维细胞生长因子、L-谷氨酸、非必要氨基酸;培养条件为:27-30℃培养。
4.权利要求1所述刀鲚性腺体细胞系的建立方法,其特征在于,每升基础培养基中添加:120-180mL胎牛血清、以青鳉鱼胚胎个数计200-600个青鳉鱼胚胎提取物、2-10mL海鲈鱼血清、2-8μg碱性成纤维细胞生长因子、0.5-2UPenicillin-streptomycin双抗。
5.一种刀鲚性腺体细胞,其特征在于,通过1-4任一项所述的建立方法构建。
6.权利要求5所述的刀鲚性腺体细胞在诱导鱼类精原干细胞分化为精子方面的应用。
7.权利要求6所述的应用,其特征在于,所述的鱼类精原干细胞为马口鱼精原干细胞或青鳉鱼精原干细胞。
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