[发明专利]一种桑黄活性成分的制备方法及其在辅助降血糖药物中的应用

说明书

本发明公开了一种桑黄活性成分的制备方法，包括以下步骤，取保藏编号为CGMCC NO.21068桑黄菌株（Sanghuangporus sanghuang）发酵液，将菌丝体过滤，分离得到桑黄发酵液，加热浓缩，加95%的乙醇浸泡处理，离心处理，收集上清液，用旋转蒸发仪进行乙醇回收，收集醇溶物，加水溶解后‑20℃冷冻，真空冷冻干燥处理后粉碎既得桑黄发酵液醇溶样；桑黄发酵液醇溶样使用四种有机溶剂进行分级萃取，得到萃取物。本研究结果将为后续桑黄液体发酵活性物质的开发利用和降血糖等相关药品的研发提供一定的试验基础和理论依据，具有一定的理论意义和实际应用价值。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种桑黄活性成分的制备方法及其在辅助降血糖药物中的应用。

背景技术

桑黄Sanghuangporus sanghuang是一种珍贵的多年生大型药用真菌，通常着生于桑属(Morus L.)植物上，又名桑耳、桑臣、桑黄菇，被誉为“森林黄金”，是一种名贵的中药材，在我国传统中医药中用于痢疾、盗汗、血崩、血淋、脐腹涩痛、脱肛泻血、带下、经闭等症治疗。

随着国内外专家们对桑黄的抗癌机理及药用价值研究的越来越深入，桑黄已广泛被人们所认识，科学研究证明，桑黄多糖能提高人体免疫力，抑制肿瘤细胞的增殖，清除自由基，防止衰老，活化胰脏功能，降低血糖，有助于糖尿病患者康复，抗血栓，稳定血压等作用。桑黄多糖的提取是从桑黄子实体或者桑黄菌丝体通过醇沉提取，但是醇溶组分的研究较少，仅有CN111096983A专利中提到用火木层孔菌的菌丝体醇溶组分进行了降血糖活性研究，但火木层孔菌Phellinus ignarius与桑黄S.sanghuang分别为不同属的种类，没有可比性。关于将桑黄菌丝体过滤掉之后，用发酵液提取出的醇溶性活性成分的相关研究，尚未见报道。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种具有降血糖的桑黄活性成分的制备方法，将桑黄发酵液中的有效成分通过不同的萃取剂提取，得到有效降低血糖的桑黄活性成分。本文首次通过系统的溶剂法，获得桑黄发酵液不同溶剂萃取部位，通过细胞实验初步筛选出其降血糖活性部位，为进一步寻找桑黄降血糖作用的有效成分提供科学依据。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种具有降血糖的桑黄活性成分的制备方法，包括以下步骤：

（1）取发酵10-12d的桑黄菌株发酵液，将菌丝体过滤，分离得到桑黄发酵液加热浓缩，加95 %的乙醇浸泡处理24 h，分层后，5000 rpm，5 min离心处理，收集上清液，用旋转蒸发仪进行乙醇回收，收集醇溶物，加水溶解后-20℃冷冻，真空冷冻干燥处理后粉碎既得桑黄发酵液醇溶样；

（2）桑黄发酵液醇溶样依次使用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇四种有机溶剂进行分级萃取，得到石油醚萃取物、氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物。

优选地，所述步骤（2）中的桑黄发酵液醇溶样分别用石油醚和氯仿体积比 1:1 的混合溶剂，氯仿和乙酸乙酯体积比2:3的混合溶剂，石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇体积比2:2:3:3的混合溶剂萃取。

优选地，所述步骤（2）中桑黄发酵液醇溶样与石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇的体积比为1：1-5。

优选地，所述步骤（2）中石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇的萃取时间分别为2h。

优选地，所述步骤（2）中石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇的萃取次数比2：2：6：8。