[发明专利]一种抗B细胞成熟抗原的抗体及其应用

说明书

本发明提供一种抗B细胞成熟抗原的抗体及其应用。所述抗B细胞成熟抗原的抗体为BCMA‑21，其重链可变区包括：SEQ ID NO.1所示的互补决定区1、SEQ ID NO.2所示的互补决定区2和SEQ ID NO.3所示的互补决定区3。本发明利用噬菌体展示纳米抗体库筛选得到的抗体具有特定的CDR区，所得抗体可特异性的结合BCMA抗原，且亲和力较好，其K_a(1/Ms)为7.48E+06，K_d(1/s)为8.50E‑04，K_D(M)为1.14E‑10，将其作为抗原结合结构域构建嵌合抗原受体和CAR‑T细胞，对BCMA阳性的肿瘤细胞具有明显的杀伤活性。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种抗B细胞成熟抗原的抗体及其应用。

背景技术

多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是一种恶性浆细胞病，其肿瘤细胞起源于骨髓中的浆细胞，而浆细胞是B淋巴细胞发育到最终功能阶段的细胞。因此多发性骨髓瘤可以归到B淋巴细胞淋巴瘤的范围。其特征为骨髓浆细胞异常增生伴有单克隆免疫球蛋白或轻链(M蛋白)过度生成，极少数患者可以是不产生M蛋白的未分泌型MM。多发性骨髓瘤常伴有多发性溶骨性损害、高钙血症、贫血、肾脏损害。由于正常免疫球蛋白的生成受抑，因此容易出现各种细菌性感染。

抗体在骨髓瘤的治疗中显示出一定的潜力，但目前尚没有足够的临床数据来证实。因此，开发能够有效治疗多发性骨髓瘤的新方法意义重大。

MM的免疫治疗的一种候选抗原是B细胞成熟抗原(B Cell Maturation Antigen，BCMA或CD269)。BCMA RNA在MM细胞中普遍检测到，多发性骨髓瘤患者的浆细胞表面可检测到BCMA蛋白。BCMA是肿瘤坏死因子受体(TNF)超家族的成员，可结合B细胞激活因子(BAFF)和增殖诱导配体(APRIL)。据报道，在正常细胞中，BCMA主要由浆细胞和一部分成熟B细胞表达，而在大部分B细胞以及其它器官上都不表达。BCMA缺乏的小鼠看上去一切正常，似乎很健康，而且B细胞数量正常，但浆细胞却不能长期存活。在多发性骨髓瘤细胞中，BCMA的表达水平显著高于健康的浆细胞，是一种理想的靶标。

近年来，嵌合抗原受体修饰的T淋巴细胞(Chimeric antigen receptor T cells，CAR-T)发展迅速。BCMA是CAR-T细胞治疗MM的靶抗原。嵌合抗原受体是人工合成的功能类似T细胞受体的融合蛋白，主要包括信号肽、抗原识别区、铰链区、跨膜区、胞内信号区。在结合靶抗原后，嵌合抗原受体形成聚体、通过胞内信号分子活化T细胞，分泌穿孔素和颗粒酶素B等实现对靶细胞的杀伤。因此，CAR-T细胞识别靶细胞不依赖于MHC(majorhistocompatibility complex，MHC)，从而可避免因肿瘤细胞MHC分子下调而导致的免疫逃逸。

因此，将抗BCMA的嵌合抗原受体基因通过基因工程方法导入T细胞所制备的BCMACAR-T，可使得BCMA CAR-T细胞特异性识别表达BCMA的多发性骨髓瘤细胞并将其杀死，从而实现其抗肿瘤作用，对靶向BCMA的免疫治疗方法具有较大的临床转化价值。

发明内容

鉴于现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种抗B细胞成熟抗原的抗体及其应用。所述抗BCMA的单克隆抗体具有高亲和力，能够作为嵌合抗原受体分子的抗原结合结构域构建CAR-T细胞，所得CAR-T细胞在肿瘤方面具有较好的应用前景。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种抗B细胞成熟抗原(BCMA)的抗体，所述抗体为BCMA-21，其重链可变区包括：SEQ ID NO.1所示的互补决定区1(CDR1)、SEQ ID NO.2所示的互补决定区2(CDR2)和SEQ ID NO.3所示的互补决定区3(CDR3)；

其中，SEQ ID NO.1的序列为GYTDSSNL；