[发明专利]一类非洲爪蟾胰高血糖素样肽-1类似物及其应用

说明书

一种非洲爪蟾GLP‑1类似物及其合成方法和应用，本发明通过对非洲爪蟾GLP‑1的侧链和及C末端进行结构修饰，得到具有更高降糖活性和更长药理作用时间的非洲爪蟾GLP‑1类似物。本发明的非洲爪蟾GLP‑1类似物的生物活性显著提高，具有很强的长效降糖和减肥作用。

本发明是分案申请，原申请的申请号是2017111943239，申请日是2017年11月24日，发明名称是非洲爪蟾GLP-1类似物及其用途。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一类非洲爪蟾胰高血糖素样肽-1类似物及其应用。

背景技术

糖尿病(Diabetes mellitus，DM)是一组由遗传和环境等多种病因引起以慢性高血糖为特征的代谢性疾病群。由于胰岛素分泌相对或绝对不足；或胰岛素作用缺陷引起糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱。持续高血糖是基本特征。久病可引起多系统损害，导致眼、肾、神经、及心脑血管、下肢等器官的慢性并发症。2016年3月6日，世界卫生组织首次发布全球糖尿病报告，显示全球糖尿病成年人患者近40年内增加了3倍，其中多数生活在发展中国家。报告显示，中国成年人患糖尿病率接近10％。糖尿病分1型糖尿和2型糖尿病和妊娠期糖尿病和其他特殊类型糖尿病。研究发现2型糖尿病患者占90％以上。目前糖尿病的治疗方法主要包括口服降糖药物和胰岛素治疗，但这些方法在长期的治疗中会产生毒副作用。

胰高血糖素样肽-1(Glucagon-Like Peptide-1，GLP-1)具有保护β细胞的作用，GLP-1可作用于胰岛β细胞，促进胰岛素基因的转录、胰岛素的合成和分泌，并可刺激胰岛β细胞的增殖和分化，抑制胰岛β细胞凋亡，增加胰岛β细胞数量。此外，GLP-1还可作用于胰岛α细胞，强烈地抑制胰高血糖素的释放，并作用于胰岛δ细胞，促进生长抑素的分泌，生长抑素又可作为旁分泌激素参与抑制胰高血糖素的分泌。研究证明，GLP-1可通过多种机制明显地改善2型糖尿病动物模型或患者的血糖情况，其中促进胰岛β细胞的再生和修复，增加胰岛β细胞数量的作用尤为显著，这为2型糖尿病的治疗提供了一个非常好的前景。然而天然GLP-1存在局限性，即它的半衰期特别短，分泌2～3分钟后就会被二肽基肽酶(DPP-IV)降解，即使外源性给予GLP-1，也同样很快会被DPP-IV降解。另外，内源性GLP-1还会被肾脏快速滤过代谢，其体内半衰期仅为2-3min。因此，需要我们寻找和GLP-1具有相似的生物活性，但能在体内长效作用的新型GLP-1受体激动剂。

非洲爪蟾GLP-1(XenGLP-1)的降糖活性优于天然GLP-1，另外其特殊的氨基酸序列使其具有更好的体内稳定性，是一个优良的先导多肽。天然产物中的脂肪酸类化合物有比较强的血清蛋白结合率，血清白蛋白结合以后的药物与游离药物在体内产生平衡，缓慢释放实现长效化。同时血清白蛋白结合药物不易被肾小球滤过，可以避免肾脏的滤过代谢。所以，我们设计了以长链脂肪酸为母核的脂肪酸类化合物，通过谷氨酸(γ-Glu)或短链聚乙二醇-谷氨酸(PEG-γ-Glu)与XenGLP-1肽链相连接。

发明内容

本发明涉及一类非洲爪蟾胰高血糖素样肽-1(XenGLP-1)类似物，其结构具有以下形式：

His-Xaa₁-Glu-Gly-Thr-Tyr-Thr-Asn-Asp-Val-Thr-Glu-Tyr-Leu-Glu-Glu-Glu-Ala-Ala-Xaa₂-Glu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Ile-Xaa₃-Gly-Xaa₄-Xaa₅(SEQ.ID NO:1)

其中：

Xaa₁:Ala，Gly或Aib；

Xaa₂:Lys(fatty acid analog)或Lys；

Xaa₃:Lys(fatty acid analog)或Lys；