[发明专利]一种胰岛素和白介素-10双基因修饰重编程间充质干细胞及其制备方法与应用在审
| 申请号： | 202110189352.6 | 申请日： | 2021-02-20 |
| 公开（公告）号： | CN112813033A | 公开（公告）日： | 2021-05-18 |
| 发明（设计）人： | 赵振林 | 申请（专利权）人： | 深圳市瑞普逊科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/85;A61K35/28;A61K38/20;A61K38/28;A61P3/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 518037 广东省深圳市福田区华*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 胰岛素 白介素 10 基因 修饰 编程 间充质 干细胞 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种胰岛素和白介素-10双基因修饰的重编程间充质干细胞，其特征在于，所述双基因修饰的间充质干细胞为过表达胰岛素和白介素-10的间充质干细胞。
2.根据权利要求1所述的一种胰岛素和白介素-10双基因修饰重编程间充质干细胞，其制备方法特征在于，包括如下步骤：1）构建嵌合胰岛素和白介素-10双基因重组质粒载体，载体结构为pcDNA3.1-CMV-insulin-PolyA-PGK-IL10-BGH；2） 用所构建的重组质粒载体转染骨髓间充质干细胞，得到胰岛素/白介素10双基因修饰重编程间充质干细胞；3）筛选G418抗性MSC细胞克隆，得到过表达胰岛素和白介素-10的MSC细胞株。
3.根据权利要求1或2所述的一种胰岛素和白介素-10双基因修饰重编程间充质干细胞及其制备方法，其特征在于，（1）构建重组表达载体的目的基因为胰岛素和白介素-10，双基因所构成的目的序列采用共表达方式设计，目的序列的结构为Insulin-PolyA-PGK-IL10;(2)表达质粒选择pcDNA3.1，载体双酶切位点为XhoI和NotI；用于转染的间充质干细胞优选用但不限于骨髓间充质干细胞。
4.根据权利要求1和2所述的一种胰岛素和白介素-10双基因修饰重编程间充质干细胞及其制备方法，其功效特征在于移植到实验性糖尿病小鼠体内可恢复胰岛素正常水平并保持血糖稳定在正常范围，本发明的双基因修饰MSC可作为药物制剂用于胰岛素依赖型糖尿病的基因治疗。
5.申请保护基于权利要求1至2任意一项所述的胰岛素和白介素-10双基因修饰重编程间充质干细胞及其制备方法在制备糖尿病药物中的应用，同时申请保护基于本发明所制得的药物。
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