[发明专利]第二链引导

权利要求书

1.一种对测序平台特异性cDNA扩增子测序的方法，包括：

-提供测序平台特异性扩增子，其中所述测序平台特异性扩增子包含双链多核苷酸，所述双链多核苷酸包含：

i)包含SEQ ID NO：1的第一末端；

ii)包含SEQ ID NO：2的第二末端；和

iii)包含双链cDNA多核苷酸的中间区域，所述双链eDNA多核苷酸包含与mRNA序列互补的第一链cDNA多核苷酸，所述第一链cDNA多核苷酸与对应于所述mRNA序列的第二链cDNA多核苷酸杂交；并且

-用含有SEQ ID NO：8的第二测序引物从第二末端对扩增子测序。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述第一末端包含第二链cDNA多核苷酸的3′聚腺苷酸区域，所述3′聚腺苷酸区域对应于mRNA序列的3′聚腺苷酸化区域。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述第二链eDNA多核苷酸的长度小于相应mRNA长度的90％。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述方法包括用第一测序引物从第一末端对扩增子进行测序，然后用第二测序引物从第二末端对扩增子进行测序。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述第一测序引物自5′至3′包含GCCTGTCCGCGGAAGCAGTGGTATCAACGCAGAGTAC(SEQ ID NO：9)或自5′至3′包含ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT(SEQ ID NO：12)的序列。

6.如权利要求1所述的方法，其中所述第二测序引物自5′至3′包含AGATGTGTATAAGAGACAG(SEQ ID NO：10)。

7.如权利要求1所述的方法，其中所述第二测序引物自5′至3′包含TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG(SEQ ID NO：11)。

8.一种对多个测序平台特异性cDNA扩增子测序的方法，包括：

-提供多个测序平台特异性扩增子，其中单独测序平台特异性扩增子包含双链多核苷酸，所述双链多核苷酸包含：

i)包含SEQ ID NO：1的第一末端；

ii)包含SEQ ID NO：2的第二末端；和

iii)包含双链cDNA多核苷酸的中间区域，所述双链cDNA多核苷酸包含与mRNA序列互补的第一链cDNA多核苷酸，所述第一链cDNA多核苷酸与对应于所述mRNA序列的第二链cDNA多核苷酸杂交；

-用含有SEQ ID NO：8的第二测序引物从第二末端对扩增子的部分测序；并且

-用自5′至3′含有GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAG(SEQ ID NO：12)的第三测序引物从第二末端对扩增子的部分测序。

9.如权利要求8所述的方法，其中所述第二测序引物包含SEQ ID NO：11。

10.一种包含5′末端和3′末端的引物，其中：

所述5′末端包含SEQ ID NO：2，且所述3′末端包含SEQ ID NO：8；或

所述5′末端包含SEQ ID NO：1，且所述3′末端包含SEQ ID NO：7。

11.如权利要求10所述的引物，其中所述5′末端包含SEQ ID NO：2，且所述3′末端包含SEQ ID NO：8。

12.如权利要求10所述的引物，其中所述引物包含SEQ ID NO：4。

13.如权利要求10所述的引物，其中所述5′末端包含SEQ ID NO：1，且所述3′末端包含SEQ ID NO：7。