[发明专利]一种蓝莓中花色苷的高效液相色谱检测方法

说明书

本发明提供了一种蓝莓中花色苷的高效液相色谱检测方法，属于光电极材料技术领域。花色苷包括飞燕草素‑3‑O‑葡萄糖苷、矢车菊素‑3‑O‑葡萄糖苷、矮牵牛花素‑3‑O‑葡萄糖苷、天竺葵素‑3‑O‑葡萄糖苷、芍药色素‑3‑O‑葡萄糖苷和锦葵色素‑3‑O‑葡萄糖苷，高效液相色谱分析的流速：0.8mL/min；检测波长：520nm；检测温度：25℃；进样体积：10μL；检测时间：60min；流动相：水相B为0.3wt％磷酸水溶液，有机相A为乙腈；梯度洗脱。本发明实现了蓝莓样品中6种花色苷的同时测定，峰面积和保留时间的标准偏差小，6种花色苷检出限和定量限低，方法灵敏度高，精密度、重现性和稳定性好。

技术领域

本发明涉及光电极材料技术领域，尤其涉及一种蓝莓中花色苷的高效液相色谱检测方法。

背景技术

花青素或花色素为水溶性天然色素，基本结构母核是2-苯基苯并吡喃，即花色基元(Flavylium)，其结构如下式所示。自然界已知的花青素有22大类500多种，其中最为常见的有6种如表1所示，分别为矢车菊素或芙蓉花色素(Cyanidin)、飞燕草素或花翠素、翠雀素(Delphinidin)、芍药素(Peonidin)、牵牛素或矮牵牛素(Petunidin)、锦葵素(Malvidin)和天竺葵素(Pelargonidin)。花青素一般以糖苷形式存在，常与一个或多个葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖等通过糖苷键形成花青苷或花色苷(Anthocyanin)，其中以花色素-3-O-葡萄糖苷为主要的花色苷。

表1 6种常见的花青素

花色苷为类黄酮类物质中能呈现红色的一族化合物，广泛存在于植物的花、果实、茎、叶和根器官的细胞液中，使其呈现由红、紫红到蓝等不同颜色。花色苷由于其独特的功能性，而被应用于清除体内自由基、增殖叶黄素、抗肿瘤、抗癌、抗炎、抑制脂质过氧化和血小板凝集、预防糖尿病、减肥、保护视力等。

花色苷的分析方法有紫外分光光度法、pH值示差法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、色谱-质谱联用法等。紫外分光光度法和pH值示差法多用于测定花色苷的总含量，毛细管电泳法和色谱-质谱联用法多用于鉴定组分类型，实际用于花色苷组分含量检测的主要是高效液相色谱法。目前，现有技术中公开了利用高效液相色谱法同时测定葡萄和葡萄酒中6种基本花色苷(参见《HPLC法同时测定葡萄和葡萄酒中6种基本花色苷》，刘冰等，中国酿造,2017,36(002):162～165)，但是仅对含花色苷种类较少的葡萄及葡萄酒中的花色苷进行很好地分离分析，而对于含花色苷种类较多的蓝莓(含有至少13种花色苷)，是很难对这6种基本花色苷得到完全分离的，势必会影响分析结果。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种蓝莓中花色苷的高效液相色谱检测方法。本发明提供的制备方法能够实现蓝莓中6种花色苷的同时测定。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种蓝莓中花色苷的高效液相色谱检测方法，所述花色苷包括飞燕草素-3-O-葡萄糖苷、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、矮牵牛花素-3-O-葡萄糖苷、天竺葵素-3-O-葡萄糖苷、芍药色素-3-O-葡萄糖苷和锦葵色素-3-O-葡萄糖苷，包括以下步骤：

将待测蓝莓样品进行预处理，得到蓝莓花青素待测溶液；

将所述蓝莓花青素待测溶液进行高效液相色谱分析，得到待测样品的色谱图，所述高效液相色谱分析的色谱条件为：

分析柱：C18柱；

流速：0.8mL/min；

检测波长：520nm；

检测温度：25℃；

进样体积：10μL；

检测时间：60min；