[发明专利]一种海参肠促成骨肽的制备方法及其应用

说明书

本发明属于活性物质筛选及应用领域，具体涉及一种海参肠促成骨肽的制备方法及其应用。海参肠经清洗匀浆后，调节PH为5～10；加入蛋白酶后在50～60℃下酶解4～8h；再经高温灭酶、离心后，经截留分子量为3kDa的超滤膜超滤，将超滤后的液体干燥，即得到海参肠促成骨肽。本发明方法工艺步骤简单，设备投资少、无环境污染，适于工业化生产；所得小分子肽具有较强的促成骨活性，既可以作为一种促进骨生成的功能食品直接食用，也可以作为食品配料或者保健品。

技术领域：

本发明属于活性物质筛选及应用领域，具体涉及一种海参肠促成骨肽的制备方法及其应用。

背景技术：

随着人口老龄化的加剧，骨健康已成为影响生存质量的决定性因素。继高血压、糖尿病、冠心病之后，世界卫生组织将骨健康系列问题疾病列为对人体危害最广泛的问题。据统计，我国是全球骨质疏松患者最多的国家，骨质疏松症患者超过1.6亿，已成第四大慢性疾病。到2020年，我国骨质疏松和低骨量患者人数将增加至2.8亿。然而，目前用于提升骨量，改善骨相关疾病的药物存在较多副作用，开发具有促骨生成作用且无副作用的天然活性成分十分紧迫且必须。

海参作为我国传统药食两用的海珍品，已被证明拥有多种营养功效，如抗动脉硬化、抗炎、提高免疫力等。随着我国海参产业的不断发展，2019年全国海参年产量达到17万吨。海参肠是海参消化吸收的场所，含有丰富的活性物质，蛋白质含量超过干重的60％，高于海参体壁，是优质的蛋白来源。数据显示海参肠重量能达到海参重量的30～40％，即每年海参肠产量可达5-7万吨。然而，在实际海参生产加工过程中，海参肠因携带大量泥沙，往往被当作废弃物丟弃，未得到充分的开发利用，造成了严重的资源浪费及环境污染。

目前市面上的海参肠产品较少，有广药集团的“生命搭档”复合多肽饮品，有增强机体免疫力、抗病毒、抗疲劳等效果；修正铁哥海参肠肽压片糖果，也具有抗疲劳、恢复体力的功效。对已有专利进行检索，有使用超声波辅助酶解制备海参肠多肽(201610683008.1)，利用海参肠多肽制备具有抗疲劳、降血脂等保健功能的海参肠多肽胶囊(CN101422205)及利用海参肠自溶制备具有抗氧化功能活性物质的方法(CN103141872A)。然而，尚未见到关于海参肠与骨生成之间的联系，以及制备具有促骨生成作用的海参肠促成骨肽的相关报道。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是实际海参生产加工过程中，海参肠因携带大量泥沙，往往被当作废弃物丟弃，未得到充分的开发利用，造成了严重的资源浪费及环境污染；而且也尚未见到关于海参肠与骨生成之间的联系，以及制备具有促骨生成作用的海参肠小分子肽的相关报道。

为解决上述问题，本发明提供了一种海参肠酶解物的制备方法及其在促骨生成制品中的应用，通过离心-超滤-干燥分离纯化工艺制备得到了一种海参肠促成骨肽，并验证了该小分子肽具有较强促成骨能力。

为达到上述目的，本发明具体通过以下技术方案实现：一种海参肠酶解物，为海参肠经蛋白酶酶解后，再经离心超滤得到分子量小于3kDa的酶解物。小分子肽具有吸收快速、高效等特点，有助于其促成骨活性。

一种海参肠促成骨肽的制备方法，海参肠经清洗匀浆后，调节PH为5～10；加入蛋白酶后在50～60℃下酶解4～8h；再经高温灭酶、离心后，经截留分子量为3kDa的超滤膜超滤，将超滤后的液体干燥，即得到海参肠小分子肽。该酶解条件可以保持海参内源自溶酶的活性，一方面提升了酶解效率，另一方面保持自溶酶活性，使其与外蛋白酶协同作用，高效的酶切得到更多低分子量活性、更高成骨活性的肽片段。

进一步的，清洗匀浆步骤具体为将新鲜海参肠洗净去泥沙，加入料液比为1:4～1:8的去离子水匀浆。该料液比在保证酶解效率的前提下，最大程度的节约资源，降低后续干燥处理难度。

进一步的，所述蛋白酶为中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶或胰蛋白酶中的任一种或一种以上的混合物。以上蛋白酶均为常见市售蛋白酶，价格低廉，易于获得。