[发明专利]抗体组合物及其筛查移植后淋巴细胞增殖性疾病的应用

权利要求书

1.一种用于流式细胞术检测外周血筛查移植后淋巴细胞增殖性疾病的抗体组合物，其特征在于，其由第一组抗体和第二组抗体组成，其中：

第一组抗体由抗CD19抗体、抗CD38抗体、抗CD20抗体、抗CD56抗体和抗CD45抗体组成；其中，抗CD19抗体、抗CD38抗体、抗CD20抗体、抗CD56抗体和抗CD45抗体均为单克隆抗体；

第二组抗体由抗胞浆kappa抗体和抗胞浆lambda抗体组成；其中，抗胞浆kappa抗体和抗胞浆lambda抗体均为多克隆抗体。

2.根据权利要求1所述的抗体组合物，其特征在于，各抗体均为荧光素标记的抗体；

抗CD19抗体、抗CD38抗体、抗CD20抗体、抗CD56抗体、抗CD45抗体的荧光素标记按顺序分别为：PE-Cy7、APC、APC-Cy7、BV421、V500；

抗胞浆kappa抗体、抗胞浆lambda抗体的荧光素标记按顺序分别为FITC、PE。

3.根据权利要求1所述的抗体组合物，其特征在于：

第一组抗体为抗CD19抗体、抗CD38抗体、抗CD20抗体、抗CD56抗体和抗CD45抗体按照3:3:2:3:3的体积比混合的混合物；

第二组抗体为抗胞浆kappa抗体和抗胞浆lambda抗体按照1：1的体积比混合的混合物。

4.一种用于流式细胞术检测外周血筛查移植后淋巴细胞增殖性疾病的试剂盒，其特征在于，其包括第一容器和第二容器，其中，第一容器容置权利要求1-3任一项所述的抗体组合物的第一组抗体，第二容器容置权利要求1-3任一项所述的抗体组合物的第二组抗体。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，该试剂盒还包括：红细胞裂解液、破膜剂、缓冲液、与流式细胞仪配套使用的流式管中的一种或多种。

6.权利要求1-3任一项所述的抗体组合物在制备用于流式细胞术检测外周血筛查移植后淋巴细胞增殖性疾病的试剂盒中的应用。

7.一种筛查移植后淋巴细胞增殖性疾病的装置，其特征在于，该装置包括检测单元和分析单元，其中：

所述检测单元包括用于检测待测个体外周血样本中试剂材料，获得样本中浆细胞和B细胞的检测结果；所述试剂材料包括权利要求1-3任一项所述的抗体组合物；

所述分析单元用于分析检测单元的检测结果。

8.根据权利要求7所述的装置，其特征在于，所述检测单元包括利用权利要求1-3任一项所述的抗体组合物对待测样本进行处理后制备流式细胞上机样品；进行流式细胞上机检测；其中：

利用权利要求1-3任一项所述的抗体组合物对待测样本进行处理后制备流式细胞上机样品的过程包括步骤：

（1）将外周血加入到流式管中，使呈单个细胞悬液状态，并保证细胞数在1×10⁶/管-1×10⁷/管，体积不超过160μl；

（2）将步骤（1）处理得到的样本，加入PBS缓冲液混匀，37度孵育，离心去除上清；

（3）选择性地重复步骤（2）；

（4）步骤（3）所得样本，加入PBS混匀，离心去除上清；

（5）步骤（4）所得样本与权利要求1-4任一项所述抗体组合物的第一组抗体混匀后，室温避光孵育；

（6）向步骤（5）孵育后的流式管中加入破膜剂A液，室温避光孵育；

（7）向步骤（6）孵育后的流式管中加入1×溶血素，室温避光孵育；

（8）将步骤（7）孵育后的流式管离心去上清，然后加入破膜剂B液和权利要求1-4任一项所述抗体组合物的第二组抗体，室温避光孵育；

（9）向步骤（8）孵育后的流式管中加入PBS缓冲液洗涤，离心后去上清，用PBS缓冲液重悬细胞；

（10）对步骤（9）重悬细胞进行流式细胞上机检测；

进行流式细胞上机检测时，分别选择CD45弱表达/CD38强表达设门选出浆细胞，CD19/侧向角光散射和CD20/SSC抗体设门选出B细胞。

9.根据权利要求7所述的装置，其特征在于，所述分析单元分析检测单元的检测结果时，按照以下方式的至少一种进行判断：

首先判断B细胞门设置时，CD19/SSC或者CD20/SSC细胞是否一致；

单克隆B细胞的判断：如果B细胞或者B细胞的一部分出现胞浆kappa/胞浆lambda比值3或者1/3，或者成熟B细胞不表达胞浆kappa、胞浆lambda，则判断为异常单克隆B细胞；

单克隆浆细胞的判断：如果浆细胞或者B细胞的一部分出现胞浆kappa/胞浆lambda比值4或者1/4，或者不表达胞浆kappa、胞浆lambda，则判断为异常单克隆浆细胞。