[发明专利]一种高耐砷硫氰化物降解菌株及其应用

说明书

本发明公开了一种高耐砷硫氰化物降解菌株及其应用，该菌株经鉴定为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)，编号为TDB‑1，保藏于中国微生物菌种保藏管委会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.21602。该菌株具有高耐砷的特性，其制成的菌剂可在高浓度砷环境中对硫氰化物进行有效降解，而且降解速度快且效果好。

技术领域

本发明涉及微生物及硫氰化物降解领域，更具体地，涉及一种高耐砷硫氰化物降解菌株及其应用。

背景技术

硫氰化物是一种含有S-C≡N的化合物，其毒性大约为氰化物的1/7。在金矿氰化堆浸场地中来源于氰化物的转化，为氰化物的衍生物，在硫化矿等还原环境中转化率可高达50％以上。长期接触硫氰酸盐会妨碍机体对碘元素的利用，抑制甲状腺活性，500mg NaSCN/kg体重是动物的最低致死量，如果摄入过多的硫氰酸盐则会引起人体中毒，当血液中SCN^-含量达到150mg/L时是相当危险的。另外，硫氰酸盐在一定的条件下也可转化为氰化物。在硫氰酸盐的酸性溶液中，锌可以将其还原为氰化氢和硫化氢两种剧毒物质；在臭氧的氧化作用下硫氰酸盐也可部分转化为氰化物。在有色金属矿物提取金银铜、氰化电镀、化工、炼焦等行业中均伴有大量的硫氰酸盐废水、废渣以及场地污染土壤等。据统计，金矿工业废水中的硫氰化物浓度范围大致在500～1500mg/L；纺织印染工业废水中硫氰化物浓度大致在500～1000mg/L；焦化废水中则在50～400mg/L。

硫氰酸盐污染治理方法包括化学法、物理化学法、生物法、自然降解法及联合工艺法。其中生物法是指利用硫氰化物降解功能菌将硫氰化物分解为CO₂、氨等去除。生物法降解硫氰化物因其成本低廉，环境友好，处理效果好等优点，被认为是最具潜力和前景的硫氰化物降解技术。

近年来，国内外研究人员在筛选分离硫氰化物降解菌剂方面做了大量工作，分离出假单胞菌、克雷伯菌、丙酸杆菌等多种菌株。Changsoo Lee从硫氰化物污染场地中筛选出一株克雷伯菌(Klebsiella sp.)，培养液中220mg/L的SCN^-16天后完全降解；LukhanyoMekuto分离出的一株铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa STK 03)200h内降解250mg/L SCN^-的效率达98％；Elaine M筛选出的假单胞菌BMV8(pseudomonas sp.)降解290mg/L的SCN^-，3天内降解率达100％。

在有色冶炼行业采用氰化法提取金、银等金属时，矿石中伴生的各类复杂重金属也随之进入废水废渣中，经过检测分析，发现各类含氰废水废渣中砷的复合污染尤为突出。根据文献报道，砷作为一种高毒性污染物，其对环境微生物的自然代谢过程影响较大，可抑制微生物的活性。有研究表明，当土壤中的有效态砷含量下降后，土壤中的细菌总量升高，从而改变了土壤中微生物的生态功能多样性，说明砷对环境中微生物的生态功能有一定的影响。

生物法处理含砷场地中硫氰化物污染物的关键是寻找同时耐受高浓度硫氰化物和砷、降解效果好的微生物菌株，因此，从自然界筛选能在抗砷前提下降解硫氰化物的菌株成为研究人员的重要任务之一。

发明内容

为了解决现有技术中存在的上述技术问题，本发明的目的之一在于提供一种高耐砷硫氰化物降解菌株，该菌株属于恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)，菌株编号为CGMCCNO.21602，于2021年1月7日保藏于中国微生物菌种保藏管委会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.21602。

本发明的目的之二在于提供一种含有上述高耐砷硫氰化物降解菌株的菌剂。

本发明的目的之三在于提供上述菌剂的制备方法，该制备方法包括以下步骤：

S1、菌种活化：在4℃条件下保存在营养琼脂培养基上的试管斜面菌种移至20℃～25℃条件下活化4h～8h；