[发明专利]一种定量检测人体血清淀粉样蛋白A的试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种定量检测人体血清淀粉样蛋白A的试剂盒，其特征在于，包括试剂R1以及试剂R2；

所述试剂R1包括的成分及相应的含量为： MOPS缓冲液50-200mM，Tween-20 0.1-0.5%，A90 0.1-0.5%，Proclin-300 0.1-0.5%，NaCl 0.1-0.8%以及PEG6000 1-2%；

所述试剂R2包括的成分及相应的含量为：Bicine缓冲液50-100mM，BSA 1-5%，Proclin-300 0.1-0.5%，NaCl 0.1-0.8%以及包被有SAA单克隆抗体的胶乳颗粒；

所述试剂R1的pH为6.4，所述试剂R2的pH为7.0；

所述包被有SAA单克隆抗体的胶乳颗粒的制备过程包括：向使用NHS-EDC活化后的胶乳微球中同时添加0.5-1%组分A、0.5-1%组分B以及SAA单克隆抗体，所述组分A选自吗啉或哌啶中的至少一种，所述组分B选自苯甲酸或水杨酸中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的一种定量检测人体血清淀粉样蛋白A的试剂盒，其特征在于，所述组分A为吗啉，所述组分B为苯甲酸。

3.根据权利要求1或2所述的一种定量检测人体血清淀粉样蛋白A的试剂盒，其特征在于，所述包被有SAA单克隆抗体的胶乳颗粒的粒径范围为100-200nm。

4.一种如权利要求1-2任一项所述的一种定量检测人体血清淀粉样蛋白A的试剂盒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）试剂R1的制备

试剂R1按照下述配方进行配置：

MOPS缓冲液50-200mM，Tween-20 0.1-0.5%，A90 0.1-0.5%，Proclin-300 0.1-0.5%，NaCl 0.1-0.8%以及PEG6000 1-2%，所述试剂R1的pH值为6.4；

（2）试剂R2的制备

① SAA胶乳颗粒制备

将胶乳微球加入标记缓冲液中，搅拌均匀；随后向其中加入活化剂NHS-EDC活化，搅拌均匀；向活化的胶乳微球溶液中同时添加0.5-1%组分A、0.5-1%组分B以及SAA单克隆抗体，所述组分A选自吗啉或哌啶中的至少一种，所述组分B选自苯甲酸或水杨酸中的至少一种；搅拌均匀后孵育6-14h；离心，弃上清，即可得包被有SAA单克隆抗体的胶乳颗粒；

② R2基础缓冲液制备

R2基础缓冲液按照下述配方进行配置：

Bicine缓冲液50-100mM，BSA 1-5%，Proclin-300 0.1-0.5%，NaCl 0.1-0.8%，

所述试剂R2的pH为7.0；

③ 得到试剂R2

将步骤①制备得到的包被有SAA单克隆抗体的胶乳颗粒加入步骤②制备得到的R2基础缓冲液中，溶解后超声，20-40℃孵育6-14h即得到试剂R2。

5.根据权利要求4所述的一种定量检测人体血清淀粉样蛋白A的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述组分A为吗啉，所述组分B为苯甲酸。

6.根据权利要求4所述的一种定量检测人体血清淀粉样蛋白A的试剂盒的制备方法，其特征在于，在所述步骤①中，所述标记缓冲液选自磷酸缓冲液或Tris缓冲液中的至少一种，所述NHS与EDC以及胶乳微球的质量比为1：（0.5-1.5）：（800-1000），所述SAA单克隆抗体与胶乳微球的质量比为1：（350-400）。

7.根据权利要求6所述的一种定量检测人体血清淀粉样蛋白A的试剂盒的制备方法，其特征在于，在所述步骤③中，所述试剂R2中包被有SAA单克隆抗体的胶乳颗粒的含量为0.05-0.1%。