[发明专利]一种改善生态养殖优良海洋红酵母及其制备方法

说明书

本发明公开了一种改善生态养殖优良海洋红酵母及其制备方法，涉及水产养殖水质改良领域，从渔场海域中采集的表层海泥、海水样品中筛选具有氨氮降解能力的海洋红酵母，再将筛选的海洋红酵母经平阳霉素和等离子体复合诱变，培养并挑选出氨氮降解能力更强且生长良好的海洋红酵母菌株。本发明的有益效果：经过平阳霉素和等离子体对海洋红酵母进行复合诱变，并筛选氨氮降解能力强且生长良好的海洋红酵母菌株，不仅可以降解海产养殖过程中产生的氨氮，净化养殖水体，而且还可以作为水产养殖动物幼体的开口饵料和整个幼体时期的饵料，有效的减少养殖成本并提高水产养殖动物幼体存活率。

技术领域

本发明涉及水产养殖水质改良领域，具体而言，涉及一种改善生态养殖优良海洋红酵母及其制备方法。

背景技术

海洋红酵母是一种广泛存在于海洋环境的真菌，具有较强的抗逆性，可以作为水质调节剂，还能合成大量类胡萝卜素，含有较高蛋白含量、维生素、微量元素和一定量的不饱和脂肪酸，并且在生长过程中产生一些生长因子和消化酶类，这些物质可以促进水产养殖动物对饲料的消化吸收，从而提高饲料的利用率。

近二十年来，集约化水产养殖业在国内外迅速发展，带来了巨大的经济利益，但是许多水产养殖户缺乏对水产养殖业生态问题严重性的充分认识，更缺乏解决问题的方法理论指导，为了单方面提高单位水体的养殖产量，片面追求高产，往往过分地加大放养密度，过度投饵、施肥，导致水体中有机物、氮、磷猛增，水体富营养化，藻类大量繁殖，水体透明度下降，水质恶化；水体中过量的有机质分解不仅消耗水体中的溶解氧，使水体环境处于缺氧状态，同时还释放出许多有害物质，如氨氮、亚硝酸氮和硫化氢等，直接或间接地危害水体中的养殖生物，使得养殖水体中生物多样性下降，优质水产品种的养殖受到水质和饵料生物的限制。

未来的水产养殖业发展将受制于水资源、土地资源、环境保护、能源利用、水产品质以及其他重要因素，因此对养殖水体及自然水域水体进行水质改良和有害物质的去除，在确保水产品安全的基础上对水产养殖水资源循环利用，并实现生态环境的自然与人工双重恢复具有重要意义。而现有技术中大多数研究侧重于促进海洋红酵母的类胡萝卜素合成、发酵工艺优化等方面，而在水产养殖水质改良方面则鲜少研究。

发明内容

针对现有技术中大多数研究侧重于促进海洋红酵母的类胡萝卜素合成、发酵工艺优化等方面，而在水产养殖水质改良方面则鲜少研究的问题，本发明公开一种改善生态养殖优良海洋红酵母的制备方法，包括如下步骤：

步骤一，将海洋红酵母接种至发酵培养基中培养，然后取培养液离心去上清液，剩余菌体用灭菌海水洗涤后，将打散的细胞悬浮于tris缓冲液中，得到细胞悬浮液；

步骤二，取细胞悬浮液转移至添加有平阳霉素的发酵培养基中进行诱变培养，得到初步诱变细胞培养液；

步骤三，取初步诱变细胞培养液涂抹于玻璃片上，并对其进行等离子体诱变，将诱变后的细胞培养液转入YPD培养基中培养；

步骤四，离心收集细胞，用灭菌海水洗涤后稀释，涂抹在添加有NH₄Cl的YPD平板上培养；

步骤五，挑取平板上生长良好的菌落，并接种至添加有NH₄Cl发酵培养基中扩大培养；

步骤六，检测发酵培养基中NH₄⁺的含量及菌落OD600，挑选出氨氮降解能力强且生长良好的海洋红酵母菌株。

优选的，发酵培养基各组份分别为：蔗糖4.0g、胰蛋白胨4.0g、酵母膏3.0g、MgSO₄0.2g，溶剂为海水100ml，pH为7.9-8.3，120℃下灭菌30min。