[发明专利]一种花生油体膜蛋白修饰的脂质体及其制备方法

权利要求书

1.一种花生油体膜蛋白修饰的脂质体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤；

（1）制备花生油体膜蛋白；

（2）称取蛋黄卵磷脂、胆固醇、α-生育酚和吐温-80加入无水乙醇中，均匀分散形成溶液A，溶液A减压旋蒸至形成一层透明脂膜；

（3）将步骤（1）所述花生油体膜蛋白分散于磷酸缓冲液中，配制成溶液B；

（4）将步骤（3）的溶液B加至步骤（2）所得的透明脂膜中，水化超声处理即得花生油体膜蛋白修饰的脂质体；

所述步骤（1）包括以下步骤：

（a）将花生仁放入三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液中浸泡8-12h；

（b）取浸泡后的花生仁放入含有MgCl₂的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液中，打浆得到花生匀浆，过滤取滤液，离心，收集乳状物；

（c）将收集的乳状物分散于三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液中，离心处理，收集乳状物，重复此步骤，最终得到乳状物D；

（d）将步骤（c）最终获得的乳状物D分散于正己烷中，冰浴超声，离心处理，去除有机相，收集沉淀，在保护气氛下吹干，即得花生油体膜蛋白；

所述三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液浓度为10mM，pH值为7.5；

步骤（2）中所述蛋黄卵磷脂、胆固醇、α-生育酚和吐温-80的质量比为（6-10）：1：0.2：0.1；所述减压旋蒸温度为40-50℃；

步骤（3）中所述磷酸缓冲液浓度为10 mM ，pH值为7.0；所述溶液B中花生油体膜蛋白质量浓度为0.01-0.03%；

步骤（4）所述超声处理为功率300-500W，处理时间15-20min。

2.根据权利要求1所述的花生油体膜蛋白修饰的脂质体的制备方法，其特征在于，步骤（a）中所述花生仁与所述三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液的料液比为1kg∶10-50L。

3.根据权利要求1所述的花生油体膜蛋白修饰的脂质体的制备方法，其特征在于，步骤（b）中所述三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液中MgCl₂的浓度为3mM；所述浸泡后的花生仁与所述含有MgCl₂的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液料液比为1kg∶10-50L；

步骤（b）中所述离心处理为温度4℃，转速9600rpm离心30min。

4.根据权利要求1所述的花生油体膜蛋白修饰的脂质体的制备方法，其特征在于，步骤（c）中所述离心处理为温度4℃，转速9600rpm离心20-30min；所述乳状物与所述三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液的料液比为1kg∶1-6L。

5.根据权利要求1所述的花生油体膜蛋白修饰的脂质体的制备方法，其特征在于，步骤（d）中所述乳状物D与所述正己烷的体积比为1∶10；所述离心处理为温度4℃，转速10000rpm离心10-20min；所述保护气氛为氮气。

6.一种如权利要求1～5任一项所述的制备方法制备的花生油体膜蛋白修饰的脂质体。