[发明专利]一种花生油体膜蛋白修饰的脂质体及其制备方法

说明书

本发明公开了一种花生油体膜蛋白修饰的脂质体及其制备方法，属于保健食品或化妆品加工技术领域。本发明提供一种利用花生油体膜蛋白稳定脂质体的方法，基于天然植物油体蛋白独特的空间拓扑结构，实现脂质体稳化修饰。其方法是将蛋黄卵磷脂，胆固醇、α‑生育酚、吐温‑80、模型载荷分散于无水乙醇，经减压蒸发除去乙醇以形成薄膜，再将提取的花生油体膜蛋白分散于缓冲液中，经薄膜水化和超声法制得纳米脂质体。花生油体膜蛋白镶嵌于脂质体中的磷脂双分子层中，降低了磷脂双分子层疏水区的流动性，从而提高了脂质体中模型载荷的贮藏保留率。本发明有望实现新型脂质体传输载体的稳态化设计，突破脂质体的实际应用瓶颈。

技术领域

本发明涉及保健食品和化妆品加工技术领域，特别是涉及一种花生油体膜蛋白修饰的脂质体及其制备方法。

背景技术

脂质体是由磷脂或其类似物分散于水相，自发形成的具有双分子层结构的封闭囊泡。其具有天然膜生物的结构、流动性和两侧不对称性，被广泛用作活性物质的包埋基质和天然生物膜的模型。脂质体双分子层可同时包埋亲水和疏水性物质，具有较好的生物相容性，无免疫抑制作用，并可定向传输至某些器官或组织中，提高被包埋物的有效作用浓度。将脂质体的粒径控制在纳米尺度并对其进行适当修饰，可进一步提高脂质体的生物相容性和体内靶向性。随着生物技术的快速发展，脂质体的制备技术日趋完善，在食品、化妆品行业也显示出巨大的应用前景。

用于脂质体构建的磷脂多为天然磷脂或其类似物，在加工及贮藏过程中易氧化水解；作为自组装包埋传输体系，脂质体在使用过程中可能存在颗粒聚集、融合、破裂、易氧化渗漏等问题，在体内也可能存在易被酶水解和巨噬细胞吞噬的问题。因此，由于纳米脂质体中的磷脂双分子层具有一定的流动性且易受环境因素的影响而氧化变质，所以纳米脂质体的刚性和稳定性一定程度上限制了其应用范围。部分辅助膜材的添加能增加其稳定性，但也在一定程度上增大了其组成和结构的多样性和复杂性。所以如何对脂质体进行修饰，以提高被修饰后的脂质体的结构刚性、贮存稳定性及氧化稳定性性能是目前的主要研究方向。

发明内容

本发明的目的是提供一种花生油体膜蛋白修饰的脂质体及其制备方法，以解决上述现有技术存在的问题。受天然植物油体结构启发，本发明采用花生油体膜蛋白作为脂质体膜材的组成成分之一。花生油体膜蛋白可镶嵌于磷脂双分子层中，降低了磷脂双分子层疏水区的流动性，从而提高了其结构刚性、贮存稳定性及氧化稳定性。在以芹菜素为模型载荷的花生油体膜蛋白修饰的脂质体中，经180d贮藏后，芹菜素保留率达91.3％，较传统无修饰脂质体保留率(49.1％)提高85.9％。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：本发明提供一种花生油体膜蛋白修饰的脂质体，所述花生油体膜蛋白镶嵌于脂质体中的磷脂双分子层中。

植物油体是由单层磷脂-油体膜蛋白组成的生物膜覆盖的甘油三酯球形结构，为谷物、油料的贮油亚细胞单元。油体膜蛋白是维持油体在多种环境压力下稳定性的重要组成成分。油体膜蛋白质主要包括油体蛋白(oleosin)、油体钙蛋白(caleosin)和油体固醇蛋白(steroleosin)三大类，其中油体蛋白是油体膜蛋白的主要成分。不同来源的油体蛋白结构类似，大都包含三个肽段区域：N-端、中间疏水区和C-端。N-端和C-端位于油体表面，中间疏水区叠贯穿于磷脂单层并嵌入甘油三酯内部，使得油体蛋白能够牢固地结合在油体表面，贡献于油体的环境稳定性。

本发明还提供了所述的花生油体膜蛋白修饰的脂质体的制备方法，包括以下步骤；

(1)制备花生油体膜蛋白；

(2)称取蛋黄卵磷脂、胆固醇、α-生育酚、吐温-80和模型载荷加入无水乙醇中均匀分散形成溶液A，溶液A减压旋蒸至形成一层透明脂膜；

(3)将步骤(1)所述花生油体膜蛋白分散于磷酸缓冲液中，

配制成溶液B；

(4)将步骤(3)的溶液B加至步骤(2)所得的透明脂膜中，水化超声处理即得花生油体膜蛋白修饰的脂质体。