[发明专利]一种固相萃取包与检测方法

权利要求书

1.一种固相萃取吸附包在对果酒中色素含量的检测中的应用，其特征在于：

所述的固相萃取吸附包包括固相萃取盐析包和固相萃取吸附材料，所述固相萃取盐析包和固相萃取吸附材料独立包装，其中所述固相萃取吸附材料为聚苯胺负载聚苯乙烯微球，所述聚苯胺负载聚苯乙烯微球粒径大小为110±5nm，且其红外图谱在1400cm^-1，1642cm^-1，3457cm^-1处出现特征峰；

所述含量的检测包括如下操作：利用所述固相萃取吸附包对待测样品进行预处理步骤和采用HPLC检测步骤；

所述预处理步骤包括：1)向果酒中加入碎瓷片或沸石，去除乙醇，得提取液；2)加入乙醇-1％柠檬酸涡旋至步骤1)所得提取液混合均匀；3)向2)加入无水硫酸钠/氯化钠混合固相萃取包，震荡提取后，离心，移取上清液；4)向3)加入聚苯胺负载聚苯乙烯微球涡旋，混匀离心，移取上清液，沉积物另存待洗；5)对4)中上清液氮吹浓缩；用乙腈-氨水复溶，过滤膜，上机待测；

所述HPLC检测的条件为：色谱柱为Dikma ODS C18色谱柱；柱温30-40℃；流动相：A/B＝0.05％乙酸铵/乙腈；采用梯度洗脱进样分离；HPLC梯度洗脱条件为：流动相A/B＝0.05％乙酸铵/乙腈，0-5min：A/B＝5％/95％；5-10min：A/B＝10％/90％；10-16min：A/B＝25％/75％；16-20min：A/B＝40％/60％；20-30min：A/B＝55％/45％；30-40min：A/B＝85％/15％；40-50min：A/B＝5％/95％；二极管阵列检测器波长设置为254nm。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述固相萃取盐析包中为氯化钠和无水硫酸钠的混合物，二者质量比为1:1-1:6。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述聚苯胺负载聚苯乙烯微球的合成方法，包括如下步骤：

(1)聚苯乙烯微球PS的制备：将苯乙烯单体和水的混合物超声分散后，加入过硫酸钾水溶液，惰性环境下发生聚合反应，反应结束后水洗、离心、干燥，得PS微球；

(2)聚苯乙烯微球的磺化：将步骤(1)所得PS微球置于浓硫酸中，超声分散均匀，30-50℃恒温反应0.5-2小时，离心分离所得固体进行冷冻干燥，得到磺化的PS微球；

(3)聚苯胺负载聚苯乙烯微球的制备：将步骤(2)所得磺化的PS微球和磷酸水溶液低温超声分散均匀，加入适量苯胺在冰浴条件下搅拌，同时逐滴加入过硫酸铵溶液，滴加完成后继续冰浴搅拌8-12h，反应完成后，产物依次用无水乙醇和稀盐酸反复离心洗涤，离心，用二次去离子水洗至溶液pH＝7，稀氨水搅拌脱氢处理，干燥，得聚苯胺负载聚苯乙烯微球。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：步骤(1)中聚合反应的温度为70-90℃；和/或聚合反应的时间为5-15h。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：步骤(1)中所述苯乙烯单体在进行步骤(1)前进行如下预处理：采用质量百分比为5％-15％氢氧化钠溶液进行碱洗，二次去离子水洗涤多次，直到水溶液呈中性。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：步骤(1)所述PS微球的粒径大小为100nm±10nm。

7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：步骤(3)中干燥的温度为50-80℃；和/或干燥的时间为8-12h。