[发明专利]一种检测试剂及定量测定过氧化氢的方法在审
申请号: | 202110211757.5 | 申请日: | 2021-02-25 |
公开(公告)号: | CN112986224A | 公开(公告)日: | 2021-06-18 |
发明(设计)人: | 马纪;黄国霞;李军生;阎柳娟;郭卫民;汪煦 | 申请(专利权)人: | 广西科技大学 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78;G01N21/33 |
代理公司: | 广州博士科创知识产权代理有限公司 44663 | 代理人: | 宋佳 |
地址: | 545006 广西壮族*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 试剂 定量 测定 过氧化氢 方法 | ||
1.一种用于测定过氧化氢的检测试剂,其特征在于,由铜离子(II)溶液、3,3′,5,5′-四甲基联苯胺溶液和缓冲溶液配制而成。
2.一种权利要求1所述的检测试剂的制备方法,其特征在于,取铜离子(II)溶液置于具塞试管中,加入3,3′,5,5′-四甲基联苯胺溶液,随后用缓冲溶液定容后摇匀。
3.一种采用权利要求1所述的检测试剂测定过氧化氢的用途。
4.根据权利要求3所述的用途,其特征在于,用于利用铜离子(II)的过氧化物酶活性测定过氧化氢。
5.根据权利要求3所述的用途,其特征在于,利用铜离子(II)的过氧化物酶的活性,催化过氧化氢氧化3,3′,5,5′-四甲基联苯胺,使溶液颜色由无色变为蓝色,变蓝的程度与过氧化氢的浓度成正比,从而构建线性关系,确定过氧化氢的含量。
6.一种定量测定过氧化氢的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)配制权利要求1所述的检测试剂,测定在652nm处的紫外吸光度值A0;
(2)向上述检测试剂中加入待测样品,测定在652nm处的紫外吸光度值A;
(3)计算ΔA=A-A0,代入线性方程ΔA=0.0268C-0.0289,求得C值;其中C为待测样品中过氧化氢的浓度,单位为μM。
7.一种定量测定过氧化氢的方法,其特征在于,包括以下步骤:
a)配制不同浓度的过氧化氢标准溶液;
b)配制缓冲溶液、铜离子(II)溶液、3,3′,5,5′-四甲基联苯胺溶液;
c)配制检测试剂:取所述铜离子(II)溶液置于具塞试管中,加入3,3′,5,5′-四甲基联苯胺溶液,随后用缓冲溶液定容,摇匀后测定在652nm处的紫外吸收强度值;
d)依次加入不同浓度的过氧化氢标准溶液,静置反应,将反应后的溶液倒入石英比色皿中,进行紫外分光光度计测试,采集紫外光谱,以紫外光谱中652nm处的紫外吸收强度变化值对过氧化氢的浓度建立定量分析的标准曲线,拟合得到线性方程;
e)配制待测样品溶液;
f)在检测试剂中,加入待测样品溶液,充分反应后,采集紫外光谱,读取652nm处的紫外吸收强度值,带入到线性方程,计算待测样品中过氧化氢的浓度数值,从而实现对待测样品中过氧化氢的定量检测。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,线性方程为ΔA=0.0268C-0.0289,C值为溶液中过氧化氢的浓度,单位为μM。
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