[发明专利]一种食用菌的冷冻保藏方法

权利要求书

1.一种食用菌的冷冻保藏方法，其特征在于，其包括如下步骤：以珍珠岩为载体，待保藏的食用菌的菌丝蔓延生长至所述珍珠岩的内部孔隙后，将生长有待保藏食用菌的珍珠岩进行冷冻保藏，并在进行冷冻保藏前添加冷冻保护剂。

2.根据权利要求1所述的食用菌的冷冻保藏方法，其特征在于，所述冷冻保藏方法包括：先将珍珠岩置于培养基上，然后将待保藏的食用菌接种至所述培养基上，培养至菌丝蔓延生长至所述珍珠岩的内部孔隙后，将生长有待保藏食用菌的珍珠岩进行冷冻保藏；

优选地，培养至菌丝蔓延生长至所述珍珠岩的内部孔隙后，形成以珍珠岩为支撑结构的菌丝体颗粒，然后将外周包裹有所述待保藏食用菌的珍珠岩进行冷冻保藏。

3.根据权利要求2所述的食用菌的冷冻保藏方法，其特征在于，所述待保藏的食用菌在所述培养基上的培养温度为15-30℃；

优选地，所述培养时间为8-25d。

4.根据权利要求1所述的食用菌的冷冻保藏方法，其特征在于，所述冷冻保藏方法包括：先将待保藏的食用菌接种至培养基上进行一次培养，然后将珍珠岩置于一次培养后培养基中，进行二次培养，待食用菌的菌丝蔓延生长至所述珍珠岩的内部孔隙后，将生长有待保藏食用菌的珍珠岩进行冷冻保藏。

5.根据权利要求4所述的食用菌的冷冻保藏方法，其特征在于，所述一次培养的时间为3-20d，所述二次培养的时间为7-20d；

优选地，所述一次培养的温度为15-30℃，所述二次培养的温度为15-30℃。

6.根据权利要求2-5任一项所述的食用菌的冷冻保藏方法，其特征在于，所述培养基为平板培养基或者斜面培养基；

优选地，所述培养基为PDA培养基、马铃薯综合培养基、木屑浸出培养基、豆芽汁培养基或棉籽壳培养基。

7.根据权利要求1-6任一项所述的食用菌的冷冻保藏方法，其特征在于，所述珍珠岩为膨胀珍珠岩、表面处理的膨胀珍珠岩或珍珠岩矿砂；

优选地，所述珍珠岩为无菌处理后的珍珠岩；所述无菌处理步骤包括将待处理的珍珠岩用水清洗后进行烘干、灭菌处理；

优选地，在119-122℃下进行灭菌；优选地，所述灭菌时间为30-60min；

优选地，所述珍珠岩为粒径为3-8mm。

8.根据权利要求1所述的食用菌的冷冻保藏方法，其特征在于，所述将生长有待保藏食用菌的珍珠岩进行冷冻保藏包括：将生长有待保藏食用菌的珍珠岩置于冻存管中，并向所述冻存管中添加冷冻保护剂，然后将冻存管置于程序降温仪中降温，降温后将所述冻存管置于低温下保藏；

优选地，设置所述程序降温仪的降温程序为：先以4-5℃/min降至4℃，然后以0.8-2℃/min降至-90℃；

优选地，降温后将所述冻存管置于液氮罐中保藏；

优选地，所述冻干保护剂为甘油、二甲基亚砜、吐温80、葡萄糖、海藻糖、肌醇和木糖醇中的至少一种；优选地，所述冻存管中所述冻干保护剂的添加体积浓度为5-15％。

9.根据权利要求8所述的食用菌的冷冻保藏方法，其特征在于，所述冷冻保藏方法还包括菌种的复苏，所述菌种的复苏包括如下步骤：将所述冻存管从液氮罐中取出，进行恒温水浴，待生长有食用菌的珍珠岩完全融化后转接至培养基上进行菌种的复苏培养；

优选地，恒温水浴是在30-38℃下水浴；所述恒温水浴时间为1-10min；

优选地，所述菌种的复苏培养是在15-30℃下进行。

10.根据权利要求1所述的食用菌的冷冻保藏方法，其特征在于，所述食用菌选自如下菌中的任意一种：草菇、大球盖菇、双孢蘑菇、白灵菇、鸡腿菇、香菇、竹荪、马鞍菌、平菇、金针菇、杏鲍菇、灰树花、猴头菇、茶树菇、红菇、口蘑、松口蘑和秀珍菇。