[发明专利]一种用于牙种植的生物膜制备方法

说明书

本发明公开了一种用于牙种植的生物膜制备方法，具有如下步骤：取合格的供体皮肤为原料，去除皮下组织，取一定厚度的断层皮片；将断层皮片放入氯化钠溶液中处理，揭去表皮层以获得真皮基质；将真皮基质在十二烷基硫酸钠(SDS)溶液、胰蛋白酶溶液中进行超声波处理，破碎并去除细胞成分；取去细胞真皮基质，通过乙醇浸泡进行病毒灭活；进行冷冻干燥以获得去细胞真皮基质生物膜；将冻干后的生物膜进行封装，并辐照灭菌。本发明能够获得一种细胞外基质修复材料，克服了来源于异种材料的免疫原性及合成胶原膜的易降解性，为牙种植提供一种细胞外基质生物材料。

技术领域

本发明涉及医学生物材料技术领域，具体的说是一种用于牙种植的生物膜制备方法。

背景技术

在口腔医学领域，修复牙列缺失或缺损的常用方法是牙种植，种植部位的骨量是种植成功的关键，如果种植部位存在牙槽嵴过低，骨组织缺损，影响种植体植入效果。

引导骨再生技术是利用一种生物膜，在骨缺损与牙龈软组织缺损区的骨质得到修复。目前国内使用的修复膜有瑞士的Bio-Gide可吸收生物膜、烟台正海生物科技有限公司的海奥口腔修复膜、国产博特医用胶原修复膜。其中Bio-Gide及海奥口腔修复膜来源于异种材料，存在一种免疫原性；博特医用胶原膜为合成胶原膜，使用中容易提前降解。

因此，目前牙种植中使用的生物膜存在一定免疫源性或易降解的问题，难以保证生物膜稳定作用。

发明内容

针对现有技术中存在的上述不足之处，本发明目的是提供一种用于牙种植的生物膜制备方法，以处理来源于人类组织的皮肤，获得一种细胞外基质修复材料，克服了来源于异种材料的免疫原性及合成胶原膜的易降解性，为牙种植提供一种细胞外基质生物材料。

本发明为实现上述目的所采用的技术方案是：一种用于牙种植的生物膜制备方法，具有如下步骤：

S1，取皮：取合格的供体皮肤为原料，去除皮下组织，取一定厚度的断层皮片，包括表皮层和部分真皮层；

S2，去表皮层：将步骤S1所得的断层皮片进行裁剪后，放入氯化钠溶液中处理，揭去表皮层以获得真皮基质；

S3，超声波去细胞成分：将步骤S2所得的真皮基质在十二烷基硫酸钠(SDS)溶液、胰蛋白酶溶液中进行超声波处理，破碎并去除细胞成分；

S4，病毒灭活：取经过步骤S3处理后的去细胞真皮基质，通过乙醇浸泡进行病毒灭活；

S5，冷冻干燥：取经过步骤S4处理后的去细胞真皮基质，进行冷冻干燥以获得去细胞真皮基质生物膜；

S6，包装及辐照：将经过步骤S5处理后所得冻干后的生物膜进行封装，并辐照灭菌。

所述步骤S1采用鼓式取皮机或电动取皮刀进行处理，取0.3～0.6mm的断层皮片。

所述步骤S2中所用氯化钠溶液的浓度为1～2mol/L，断层皮片在氯化钠溶液中以30～37℃恒温震荡16～36h。

所述步骤S3在对真皮基质进行超声波处理时，首先将真皮基质放入5～20g/L的十二烷基硫酸钠(SDS)无菌生理盐水溶液中，在超声条件下室温处理0.5～4h，破碎细胞，并将细胞碎片清洗去除；

然后放入1～2.5g/L的胰蛋白酶无菌生理盐水溶液中，超声条件下清洗20～60min，进一步去除细胞成分。

所述步骤S4中对去细胞真皮基质进行病毒灭活时，将去细胞真皮基质用70％的乙醇浸泡30～60min。

所述步骤S5在进行冷冻干燥的具体流程为：

(1)处理温度由室温至-35℃进行调整，每分钟调整2.5℃，至-35℃时维持60min，真空设定为100Pa；