[发明专利]一种超长链核酸合成生产工艺

权利要求书

1.一种超长链核酸合成生产工艺，其特征在于，包括以下步骤：

第一步、微量合成柱的制备；

第二步、超长链核酸合成；

第三步、超长链氨解处理；

微量合成柱的制备具体包括以下步骤：

1）称取购买30-40umol/g的2000A通用CPG粉，以CPG：聚乙烯=1：28.8的比例称取，混匀，得到S1粉并用密封干燥容器装好备用；

2）取制作好的模具，模具布有孔直径为4mm，高为2mm上下贯通的圆柱形空孔；将制好的S1粉填充严实到模具孔中，孔上下用平面玻璃密封卡紧，做好备用S2；

3）将烘箱打开，温度设置到200℃，当烘箱加热到200℃，打开烘箱将S2放进烘箱，打开烘箱使温度降到170℃，关闭烘箱加热至196℃时将模具取出，烧制时间控制在25min，如果温度提前到达196℃，适当将烘箱门打开，低温烧制时间稍长点不影响，保证烧制出的载体切开有颗粒状即可，模具取出冷却后，用直径3.8mm的圆柱形工具将载体捅出，将边缘及表面完整的载体挑出，用密封干燥容器装好备用S3；

4）取上内直径为4.5mm，下内直径为3.2mm的合成空柱，将S3用工具捅至适当位置，保证载体与空柱接触无间隙；制成微量合成柱S4，用密封干燥容器装好备用；

超长链核酸合成具体步骤如下：

1）单体用无水乙腈按1:40比例溶解，加入分子筛除水备用；

2）调节仪器参数，清洁仪器，检测仪器试剂喷打及仪器密封；

3）设定试剂参数，仪器单次反应试剂量设定；

4）程序设置：通过压力调节试剂渗透使试剂充分反应，开始合成前用乙腈清洗微量合成柱，并优先进行一次盖帽反应，去除游离羟基；因合成链过长，采用分段合成，在合成到60以上碱基时，适当增加单体反应遍数，并适当加长试剂反应时长。

2.根 据权利要求1所述的一种超长链核酸合成生产工艺，其特征在于，超长链氨解处理步骤如下：

RPC或者PAGE纯化均可。