[发明专利]一种检测克罗诺杆菌的纸基检测装置及其应用

权利要求书

1.一种检测克罗诺杆菌的纸基检测装置，其特征在于，所述纸基检测装置以WhatmanNo.1滤纸作为纸基材料，通过PVC胶板处理及5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-葡萄糖苷溶液的修饰获得。

2.根据权利要求1所述的纸基检测装置，其特征在于，所述PVC胶板处理Whatman No.1滤纸的方法为：

S1、将PVC胶板切割成若干个边长为1cm×1cm的方形底板；

S2、将Whatman No.1滤纸用圆形打孔器进行打孔，打孔下来的圆形滤纸留存备用；

S3、用同样孔径尺寸的圆形打孔器在切割后的底板区域中心进行手动打孔；

S4、将一张同样形状大小的未打孔的PVC胶板作为底板，揭去底板和S3获得的打过孔的PVC胶板涂有黏胶的一侧保护薄膜，压紧对贴粘合，把S2获得的同孔径的滤纸放置在暴露的带有黏胶的孔中，用力压制使三者充分粘合，装置制作完成。

3.根据权利要求2所述的纸基检测装置，其特征在于，所述打孔器的孔径为4mm-8mm。

4.根据权利要求1所述的纸基检测装置，其特征在于，所述5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-葡萄糖苷溶液的修饰方法为：将柠檬酸-磷酸盐缓冲液与DMF按照1:1的体积比混合，用于稀释5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-葡萄糖苷溶液，再向经PVC胶板处理后的滤纸上滴加10μL稀释后的5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-葡萄糖苷溶液，干燥后完成修饰过程。

5.根据权利要求4所述的纸基检测装置，其特征在于，所述稀释后的5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-葡萄糖苷溶液浓度为0.5mM～10mM。

6.根据权利要求4所述的纸基检测装置，其特征在于，所述柠檬酸-磷酸盐缓冲液中柠檬酸溶液浓度为0.1M，磷酸氢二钠溶液浓度为0.2M。

7.根据权利要求1所述的纸基检测装置，其特征在于，所述纸基检测装置的承载温度为-20℃～80℃，加样量为8μL～20μL。

8.利用权利要求1所述的纸基检测装置检测克罗诺杆菌的方法如下：

步骤一、将克罗诺杆菌菌液离心后，用柠檬酸-磷酸缓冲液将菌体沉淀洗涤2～3次，然后加入与原菌液相同体积的柠檬酸-磷酸缓缓冲液重悬菌体；

步骤二、将重悬后的菌体进行超声，每超声10s，暂停15s为一个循环，共循环3～5次，超声参数为130W，22kHz，全程进行冰水浴；

步骤三、取8μL～20μL步骤二获得的上清液滴入纸基检测装置的加样孔，等待显色。

9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，步骤一中的柠檬酸-磷酸缓冲液的pH为6.0～7.5；步骤三所述显色反应在37℃条件下进行。

10.权利要求1所述的纸基检测装置在实时检测食品及食品加工过程中克罗诺杆菌污染中的应用。