[发明专利]A549细胞来源外泌体装载连翘酯苷A递药系统及其应用有效
| 申请号： | 202110225171.4 | 申请日： | 2021-03-01 |
| 公开（公告）号： | CN112999190B | 公开（公告）日： | 2022-06-10 |
| 发明（设计）人： | 黄海英;石延榜;郭辉;余亚辉;吕田田;薛丙权;余海艳 | 申请（专利权）人： | 河南中医药大学 |
| 主分类号： | A61K9/50 | 分类号： | A61K9/50;A61K31/7032;A61K47/46;A61P35/00;A61P35/04 |
| 代理公司： | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人： | 崔瑞迎 |
| 地址： | 450046 河南*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | a549 细胞 来源 外泌体 装载 连翘 系统 及其 应用 | ||
1.A549细胞来源外泌体装载连翘酯苷A递药系统，其特征在于，所述递药系统由A549细胞来源外泌体与连翘酯苷A溶液混合后，经冰浴超声、恒温培养恢复、离心、洗涤重悬、再次离心、重悬沉淀制得；混合溶液中，连翘酯苷A的浓度为200-800μg/mL；以蛋白量计，A549细胞来源外泌体的浓度为400-420 μg/mL。
2.根据权利要求1所述的A549细胞来源外泌体装载连翘酯苷A递药系统，其特征在于，所述A549细胞来源外泌体由以下步骤制得：
S1、A549细胞在37℃，5%CO2条件下，采用含体积分数10%胎牛血清的RPMI 1640完全培养基培养，待细胞生长密度达到90%-92%，以含体积分数1%血清的培养基继续培养24 -25h后，收集上清液；
S2、将细胞上清液4℃、100×g离心10-12min，然后4℃、2000×g离心15 -20min，浓缩上清液，4℃、15000×g离心30-35 min，上清液用0.22 μm滤膜过滤，最后4℃、120 000×g离心滤液70 -75min，PBS重悬沉淀，4℃、120 000×g再次离心65-70 min，得到的沉淀即A549细胞来源外泌体。
3.根据权利要求1所述的A549细胞来源外泌体装载连翘酯苷A递药系统，其特征在于，超声条件为：20%振幅，5 s开，5 s关，1 min循环，共循环6次，循环间隔2 min。
4.根据权利要求1所述的A549细胞来源外泌体装载连翘酯苷A递药系统，其特征在于，恒温培养恢复条件为：37℃、1 h。
5.根据权利要求1所述的A549细胞来源外泌体装载连翘酯苷A递药系统，其特征在于，离心条件为：4℃、120 000×g、70 min。
6.权利要求1所述的A549细胞来源外泌体装载连翘酯苷A递药系统在制备抗人肺上皮腺癌细胞迁移的药物中的应用。
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