[发明专利]解除二价金属离子依赖的褐藻胶裂解酶突变体及其应用有效
| 申请号： | 202110230554.0 | 申请日： | 2021-03-02 |
| 公开（公告）号： | CN112921020B | 公开（公告）日： | 2022-04-08 |
| 发明（设计）人： | 苏航;李福利;马小清 | 申请（专利权）人： | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/14;C12R1/19 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 李颖 |
| 地址： | 266101 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 解除 二价 金属 离子 依赖 褐藻 裂解 突变体 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种解除二价金属离子依赖的褐藻胶裂解酶突变体，其特征在于：突变体为AlgAT5中天冬氨酸D146突变为带正电荷的氨基酸；
或突变体为alyPG中天冬氨酸D124突变为带正电荷的氨基酸；
所述带正电荷的氨基酸为赖氨酸、组氨酸或精氨酸；
所述二价金属离子为Ca2+。
2.一种表达载体，其特征在于：表达载体含权利要求1所述任意一项突变体。
3.一种基因工程菌，其特征在于：基因工程菌含有权利要求2所述的表达载体。
4.一种权利要求1所述的解除二价金属离子依赖的褐藻胶裂解酶突变体的应用，其特征在于：权利要求1所述突变体在解除二价金属离子依赖的催化褐藻胶制备褐藻寡糖中的应用，所述二价金属离子为Ca2+。
5.一种解除二价金属离子依赖的催化褐藻胶制备褐藻寡糖的方法，其特征在于：将权利要求1所述突变体加入至褐藻胶中，在pH为5.8，0.1-0.3M的NaAC-HAC缓冲液，0.1-0.3 MNaCl，0.05-5mM CaCl2，温度50-80℃的条件下，利用突变体在解除二价金属离子依赖的催化褐藻胶反应制备褐藻寡糖，所述二价金属离子为Ca2+。
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