[发明专利]一种仿透明质酸聚氨基酸衍生物、其制备方法及其应用

说明书

本发明公开了一种仿透明质酸聚氨基酸衍生物，属于生物医药技术领域，所述衍生物为PAsp[DET‑DBCO(‑ss‑siRNA)CDM]；本发明还公开了上述衍生物的制备方法，其步骤包括：通过BLA‑NCA单体的开环聚合，合成PBLA，将DET与PBLA反应得到PAsp（DET），对PAsp（DET）进一步修饰，在其侧链上依次引入磺胺‑DBCO‑NHS和羧二甲基马来酸酐，得到PAsp[DET‑DBCOCDM]，通过PAsp[DET‑DBCOCDM]和5'‑氨基siRNA与N3‑PEG3‑NHS的连接物反应，得到目标大分子PAsp[DET‑DBCO(‑ss‑siRNA)CDM]；本发明提供了一种降甲状旁腺激素的新途径，实现从源头上阻断合成甲状旁腺激素的基因表达，降甲状旁腺作用效果好；另外，本发明所合成的衍生物，从作用机制上讲，对电解质也不影响，不会导致高钙、高磷、低钙等，因此可以达到单药有效控制甲状旁腺激素的效果。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及一种仿透明质酸聚氨基酸衍生物、其制备方法及其应用。

背景技术

继发性甲状旁腺功能亢进(secondary hyperparathyroidism，SHPT)是慢性肾脏病(chronic kidney disease，CKD)的常见并发症，其突出表现就是高甲状旁腺血症，是CKD患者发生心血管事件与死亡的重要因素。目前SHPT的主要药物为活性维生素D，但容易导致高磷、高钙血症，增加血管钙化风险。钙敏感受体(calcium sensing receptor，CaSR)激动剂(如目前上市的西那卡塞)也被用于治疗SHPT，主要的不良反应是低钙血症，因此临床上两者经常联合使用。

发明内容

本发明的目的之一，就在于提供一种仿透明质酸聚氨基酸衍生物，以解决上述问题。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是这样的：一种仿透明质酸聚氨基酸衍生物，所述衍生物为PAsp[DET-DBCO(-ss-siRNA)CDM]，其具有如下式所示的结构：

上述结构式中，15≤x≤17，93≤y≤95。

本发明的目的之二，在于提供上述的仿透明质酸聚氨基酸衍生物的制备方法，采用的技术方案为，包括以下步骤：

(1)在引发剂作用下，通过BLA-NCA单体的开环聚合，合成聚β-苄基-L-天冬氨酸，即PBLA；

(2)将步骤(1)所得的PBLA溶解于溶剂中得到PBLA溶剂，然后将二乙基甲苯(即DET)在惰性气体环境下添加到PBLA溶剂中，搅拌反应，然后进行后处理，得到聚{N-[N'-(2-氨基乙基)-2-氨基乙基]天冬酰胺}，即PAsp(DET)；

(3)将步骤(2)所得的PAsp(DET)进一步修饰，在其侧链上依次引入磺胺-dbco-nhs和羧二甲基马来酸酐，得到PAsp[DET-DBCOCDM]；

(4)将5'-氨基siRNA在缓冲液中与N3-PEG3-NHS混合反应，然后加入步骤(3)所得的PAsp[DET-DBCOCDM]，透析，即得PAsp[DET-DBCO(-ss-siRNA)CDM]。

作为优选的技术方案：步骤(1)中，所述引发剂为正丁胺，所述溶剂为二甲基甲酰胺(即DMF)，所述惰性气体为氩气。

作为优选的技术方案：步骤(2)中，反应温度为4℃，反应时间为24h。

作为优选的技术方案：步骤(2)中，所述后处理方法为：将反应混合物倒入乙酸溶液中，并依次用HCl溶液和蒸馏水透析，然后冻干。