[发明专利]用于检测诺如病毒GI型和GII型恒温扩增的引物组、试剂盒及方法

说明书

本发明属于生物检测领域，具体涉及用于检测诺如病毒GI型和GII型恒温扩增的引物组、试剂盒及方法，引物组包括诺如病毒GI型引物组和诺如病毒GII型引物组，诺如病毒GI型引物组包括外引物GI‑OF、外引物GI‑OB、内引物GI‑IF、内引物GI‑IB、环引物GI‑LF和环引物GI‑LB，诺如病毒GII型引物组包括外引物GII‑OF、外引物GII‑OB、内引物GII‑IF、内引物GII‑IB、环引物GII‑LF和环引物GII‑LB。该引物组可特异、灵敏扩增诺如病毒GI型和GII型，该检测方法操作简单、快速、准确、灵敏度高，成本较低，对实验操作人员和仪器设备要求不高，适合规模性推广和应用。

技术领域

本发明属于生物检测领域，具体涉及用于检测诺如病毒GI型和GII型恒温扩增的引物组、试剂盒及方法。

背景技术

诺如病毒(Norwalk Viruses)是一种无包膜单股正链RNA病毒，属杯状病毒科，是导致非细菌性肠胃炎的主要原因。诺如病毒可分为G I～G V五个基因群，其中引起人类感染的主要是GI和GII群。在已报道的由病原菌引起的食源性疾病中，超过58％的病例是由诺如病毒所致。据统计，在美国，诺如病毒每年造成570至800人死亡，5.6万至7.1万人住院，40万人次急诊，170万至190 万人次门诊。诺如病毒病的主要特征是喷射性呕吐、非血性腹泻、恶心、腹部绞痛和低烧等，潜伏期约为12至48小时。在健康人群中，症状持续时间一般不超过48h，属于自限性疾病，但儿童和老年人感染后症状更严重、患病时间更长，甚至增加了住院的风险。在温带地区的国家，大多数感染发生在秋季和冬季，至少70％的疫情报告发生在半封闭的区域，如卫生保健机构、学校、医院和游轮。诺如病毒可以通过多种途径感染人类，包括口腔途径，通过接触受感染者的排泄物或雾化的呕吐物，以及通过受污染的表面、食物或水传播。

由于诺如病毒具有较高传染性，因此快速、准确的检测技术对预防和控制其传播具有重要意义。目前，国内外报道的诺如病毒的核酸检测方法主要有常规PCR、巢式PCR、实时荧光定量PCR和基因芯片等。常规PCR和巢式PCR 操作繁琐，扩增产物需要经过电泳检测才能观察到扩增结果，检测时间长，灵敏度较差。实时荧光定量PCR对操作人员有很高的经验要求，对实验环境有着严格的分区要求，不利于在基层现场推广使用。基因芯片技术检测成本昂贵，稳定性较差，目前还无法在基层推广应用。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的上述不足，提供用于检测诺如病毒GI型和GII型恒温扩增的引物组、试剂盒及方法。该引物组可特异、灵敏扩增诺如病毒GI型和GII型，该检测方法操作简单、快速、准确、灵敏度高，成本较低，对实验操作人员和仪器设备要求不高，适合规模性推广和应用。

为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

第一方面，本发明提供了一种用于检测诺如病毒GI型和GII型恒温扩增的引物组，所述引物组包括诺如病毒GI型引物组和诺如病毒GII型引物组；

其中，所述诺如病毒GI型引物组包括SEQ ID NO.1所示的外引物GI-OF、 SEQ IDNO.2所示的外引物GI-OB、SEQ ID NO.3所示的内引物GI-IF、SEQ ID NO.4所示的内引物GI-IB、SEQ ID NO.5所示的环引物GI-LF和SEQ ID NO.6 所示的环引物GI-LB；

其中，所述诺如病毒GII型引物组包括SEQ ID NO.7所示的外引物GII-OF、 SEQ IDNO.8所示的外引物GII-OB、SEQ ID NO.9所示的内引物GII-IF、SEQ ID NO.10所示的内引物GII-IB、SEQ ID NO.11所示的环引物GII-LF和SEQ ID NO.12所示的环引物GII-LB。

本发明提供的一种用于检测诺如病毒GI型和GII型恒温扩增的引物组，可灵敏、特异性的有效用于快速检测诺如病毒GI型和GII型。