[发明专利]三苯双脒有关物质的HPLC检测方法

说明书

本发明提供了三苯双脒有关物质的HPLC检测方法，公开了一种同时检测三苯双脒有关物质氨脒、对苯二甲醛、单脒的高效液相方法，使主峰与相邻杂质峰峰及各杂质峰间均能达到基线分离，并提供了完整验证方案，操作简单，精密度高，稳定性好，重现性好。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体而言，涉及三苯双脒有关物质的HPLC检测方法。

背景技术

三苯双脒肠溶片是一种广谱新型抗寄生虫药物，为国际原创新药，属于国家一类新药，拥有自主知识产权，具有不良反应少、高效、低毒、剂量小，疗程短，虫迅速等优点，具有很好的抗蛔虫、十二指肠钩虫和美洲钩虫的效果，对蛲虫亦有较好的疗效，特别是对顽固的美洲钩虫感染，三苯双脒效果显著，优势更为明显。

三苯双脒肠溶片“力卓”获得一类新药证书，意味着该药品属于国际原创，是我国自主研究开发的创新药物，拥有化学结构、合成工艺及制剂处方等发明专利。随着新华制药的国际化步伐，三苯双脒肠溶片作为贡献于人类健康，致力于提高世界范围内健康水平的良药而登上国际化舞台。

三苯双脒肠溶片其有效成分三苯双脒原料药经历了由工艺开发到生产实践再到具备CGMP资格的批量生产。其工艺国际化接轨的同时，分析方法也面临新的挑战，开发新方法、利用新技术迫在眉睫。

对于全新的化学结构，基础研究始于30多年前，时间跨度大，加之分析技术、仪器日新月异，有必要对其进行新的分析方法研究。

目前三苯双脒已公开的有关物质测定方法为HPLC法(见国家药品标准WS1-(X-005)-2010Z)，具体如下：

供试液制备：精密称取含量测定项下的细粉适量(约相当于三苯双脒10mg)，于100ml量瓶中，加乙腈－三乙胺(100：0.35)溶液溶解并稀释至刻度，制成每1ml中含三苯双脒0.1mg的溶液，经0.45um有机系滤膜过滤，取续滤液作为供试液。每批供试品制备1份。

对照液制备：精密吸取供试品溶液3ml，于200ml量瓶中，用乙腈－三乙胺(100：0.35)溶液稀释至刻度，摇匀；制成每1ml中约含三苯双脒1.5ug的溶液，作为对照液。

色谱条件：流动相：(1)配比：乙腈－水－三乙胺(75：25：0.35)

(2)配制方法：取水250ml，加三乙胺3.5ml，经0.45um水系滤膜过滤，加经0.45um有机系滤膜过滤的乙腈750ml，混匀，超声脱气10分钟备用。

(3)必要时可适当调节流动相比例，以满足分离需要。根据供试品量的多少，必要时可按照流动相配比，同比例扩大或缩小，配制不同体积的流动相。

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱。Φ150mm×4.6mm

检测波长：380nm；

流速：1.0ml/min；

进样操作：按照高效液相色谱仪操作规程打开仪器，装上色谱柱，冲流动相约30分钟，检查柱压以及基线，看是否稳定。待各项指标都稳定后，取对照液10ul，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20％，连续进样测定5次，计算三苯双脒峰面积的相对标准偏差应不大于5％；理论板数以第一次的三苯双脒峰计应不低于1500。如系统适用性试验不合格，则应调查原因，并排除原因，重新进行系统适用性试验，合格后才能进行以下分析。

测定：取乙腈－三乙胺(100：0.35)溶液10ul注入液相色谱仪，作为空白对照。精密量取供试品溶液10ul，注入液相色谱仪，供试液每份进样1次，记录色谱图至主成分峰保留时间的4倍，供试液的色谱图中如有杂质峰，按自身对照法以峰面积计算，杂质总量应符合规定。

经研究发现，在实际操作过程中，上述方法存在以下不足：