[发明专利]一种诊断受试者是否患阿尔茨海默病的代谢产物及其用途

说明书

本申请公开了一种诊断受试者是否患阿尔茨海默病的代谢产物，以及用于确定生物样品中生物标志物水平的试剂在制备试剂盒中的用途。本申请的试剂盒能够替代传统的脑脊液检测，通过11种代谢产物实现对AD的诊断，并且，不仅能够区分AD患者与正常人员，还能够区分AD患者与其他痴呆患者。

技术领域

本申请涉及医药领域、病毒学领域和免疫学领域，特别是免疫学诊断领域。本申请具体涉及一种诊断受试者是否患阿尔茨海默病的试剂盒，以及用于确定生物样品中生物标志物水平的试剂在制备试剂盒中的用途。

背景技术

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是最常见的引起痴呆的神经系统退行性疾病。随着人口老龄化加重，AD带来了严重的社会和经济负担。目前脑脊液和神经影像学中的生物标记物是常规临床诊疗中最有效的AD生物标记物。然而，多为侵入性的且成本昂贵，难以在临床实践中普遍应用。此外，AD与其他类型的痴呆，如血管性痴呆(vasculardementia,VaD)，帕金森病性痴呆(Parkinson’s disease dementia,PDD)，行为变异性额颞叶痴呆(behavioral variant frontotemporal dementia,bvFTD)和路易体痴呆(dementiawith Lewy body,DLB)等可有相似的临床表现、病理和生物标志物，往往导致临床诊断困难。因此，发现外周生物标志物来区分AD与其他类型的痴呆是非常必要的。

代谢产物是参与生物化学途径的小分子，包括脂类、氨基酸、多肽、核酸和有机酸。这些代谢物是细胞、组织或整个有机体复杂生物过程中的产物，因此是可能反映疾病表型的潜在物质。代谢组学是对于代谢产物集体量化的一种分析方法，是发现新的生物标志物的有力工具，并且有助于我们理解AD的机制途径。

基于上述问题，急需一种能够有效诊断AD的方法。

发明内容

本申请发明人通过三个阶段的研究，分析了AD患者与正常人员以及其他痴呆患者的代谢产物的差异并使用差异代谢产物组来建立AD诊断模型，这个模型的鉴别能力已经在多个独立人群中得到验证。因此，本申请的代谢产物有助于AD的诊断，并且，可以区分AD患者和其他类型痴呆。

因此，在第一方面，本申请提供了一种用于诊断受试者是否患阿尔茨海默病的风险的方法，其包括：

(1)从受试者获得包含生物标志物的生物样品；

(2)测定生物样品中生物标志物的水平；

(3)基于所述生物标志物的水平，诊断受试者是否患阿尔茨海默病；

其中，所述生物标志物为己酰肉碱AcCa(6：0)，4-癸烯肉碱AcCa(10：1)，十四碳烯肉碱AcCa(14：2)，胡椒碱，癸酰肉碱AcCa(10：0)，L-乙酰肉碱，5-羟色胺，甘油磷酸胆碱，天冬氨酸，羟基棕榈酸和胆碱。

在某些实施方案中，所述生物样品选自全血，血清，血浆或脑脊液。在某些实施方案中，所述生物样品选自全血，血清和血浆。

在某些实施方案中，在步骤(2)，通过光谱、液相或气相色谱、质谱、与质谱联用的液相或气相色谱来测定所述生物样品中生物标志物的水平。

在某些实施方案中，极性代谢产物通过色谱柱(例如，Acquity HSS C18柱)进行分析。在某些优选的实施方案中，二元流动相为0.1％甲酸-水和0.1％甲酸-乙腈。

在某些实施方案中，第二馏分通过色谱柱(例如，Acquity BEC Amide色谱柱)进行分析。在某些优选的实施方案中，通过水和含5毫米碳酸氢铵的乙腈/甲醇混合物洗脱。

在某些实施方案中，脂质组通过色谱柱(例如，Accucore C30核壳色谱柱)进行分析。在某些优选的实施方案中，二元流动相为60％乙腈在水中和10％乙腈在异丙醇中。