[发明专利]一种氧杂蒽酮类化合物及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种氧杂蒽醌类化合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）发酵培养

将保藏号为GDMCC No: 61477的海绵共附生真菌Pleosporalessp.在马铃薯葡萄糖固体培养基PDA上活化3-4天后，用灭过菌的小铲子在平板上挑取真菌菌落到马铃薯葡萄糖肉汤培养基PDB中，然后置于摇床上培养，于28℃和120 rpm条件下培养14天，将发酵产物过滤，分离得到发酵液和菌体沉淀，其中所述的马铃薯葡萄糖固体培养基配制方法如下：去皮马铃薯200 g，白砂糖20.0 g，海盐35.0 g，水1 L；

（2）浸膏提取

将发酵液用与发酵液等体积的乙酸乙酯重复萃取3次，合并三次萃取所得萃取液，旋转蒸发至干后，获得粗浸膏；将菌体沉淀用由甲醇和二氯甲烷等体积混合而成的混合液浸泡过夜 ，然后抽滤，将滤过液减压浓缩得到浓缩液，将浓缩液用与浓缩液等体积的乙酸乙酯重复萃取3次，合并三次萃取所得萃取液，旋转蒸发至干后，获得粗浸膏，合并两次所得粗浸膏，得到总粗浸膏；

（3）化合物的分离制备

A.将总粗浸膏用体积比为1：1的二氯甲烷和甲醇混合溶剂溶解后，加200～300目硅胶拌样进行VLC减压柱层析，采用体积比为（1:0）-（0:1）的石油醚-乙酸乙酯溶液为流动相进行梯度洗脱，按序合并相似流分，得到6个组分Fr.1-Fr.6，其中所述的石油醚-乙酸乙酯溶液的洗脱梯度体积比依次为1：0，10:1，5:1，2.5:1，1:1，0:1；

B.将步骤（3）A收集的第2个组分进行LH-20凝胶柱层析，采用体积比为1:4的二氯甲烷-甲醇溶液为洗脱剂进行洗脱，按序合并相似流分，得到3个组分；将收集的第2个组分进行中压柱层析，采用甲醇和水为洗脱剂，甲醇从20-80%，洗脱时间150min，按序合并相似流分，得到4个组分；将收集的第3个组分采用半制备反相高效液相色谱对化合物进行分离纯化，得到氧杂蒽醌类化合物1，2，其中所述的半制备反相高效液相色谱的洗脱剂为乙腈与水按体积比35：65的比例混合，流速为2.0 mL/min；

C.将步骤（3）A收集的第3个组分进行LH-20凝胶柱层析，采用体积比为1：4的二氯甲烷-甲醇溶液为洗脱剂进行洗脱，按序合并相似流分，得到5个组分；将收集的第3个组分采用半制备反相高效液相色谱对化合物进行分离纯化，得到氧杂蒽醌类化合物3，氧杂蒽醌类化合物1, 2, 3结构式如下所示：

，

其中所述的半制备反相高效液相色谱的洗脱剂为乙腈与水按体积比40：60的比例混合，流速为2.0 mL/min。