[发明专利]一种靶向载药丝蛋白纳米粒及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种靶向载药丝蛋白纳米粒，其特征在于，所述靶向载药丝蛋白纳米粒包括丝蛋白纳米粒和靶向配体；

所述丝蛋白纳米粒负载雷公藤甲素和雷公藤红素，并与靶向配体DR5单克隆抗体偶联；所述靶向载药丝蛋白纳米粒上雷公藤甲素的载药量为35～60μg/mg；所述靶向载药丝蛋白纳米粒上雷公藤红素的载药量为110～160μg/mg；所述靶向配体与丝蛋白纳米粒的质量比为(5～20)μg:1mg；

所述靶向载药丝蛋白纳米粒的平均粒径为100～130nm；

所述靶向载药丝蛋白纳米粒的Zeta电位绝对值为20～25mV。

2.一种如权利要求1所述的靶向载药丝蛋白纳米粒的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

(1)制备共载雷公藤甲素和雷公藤红素的丝蛋白纳米粒；

(2)将步骤(1)所得的丝蛋白纳米粒与靶向配体混合进行偶联反应，得到所述靶向载药丝蛋白纳米粒。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述共载雷公藤甲素和雷公藤红素的丝蛋白纳米粒的制备方法为：

在搅拌条件下将雷公藤甲素和雷公藤红素的混合溶液加入再生丝素蛋白溶液中，水浴加热、超滤离心并冷冻干燥后制备得到所述共载雷公藤甲素和雷公藤红素的丝蛋白纳米粒。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述雷公藤甲素和雷公藤红素的混合溶液与再生丝素蛋白溶液的体积比为1:(8～12)。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述水浴加热的温度为38～45℃，时间为3～5h。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述冷冻干燥前加入海藻糖作为冻干保护剂。

7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述偶联反应中使用碳二亚胺作为羧基活化剂。

8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述偶联反应的温度为4～6℃。

9.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述偶联反应的时间为1.5～3h。

10.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述偶联反应结束后还包括超滤、离心、超声分散和冷冻干燥的步骤。

11.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

(1)在搅拌条件下将雷公藤甲素和雷公藤红素的混合溶液加入再生丝素蛋白溶液中，所述雷公藤甲素和雷公藤红素的混合溶液与再生丝素蛋白溶液的体积比为1:(8～12)，38～45℃水浴加热3～5h，超滤后于3000～4000r/min离心15～30min，洗涤，用去离子水重悬；

而后，加入质量分数为5～8％的海藻糖，超声溶解，再经过冷冻干燥后制备得到共载雷公藤甲素和雷公藤红素的丝蛋白纳米粒；

(2)在搅拌条件下将步骤(1)制备得到的丝蛋白纳米粒、DR5单克隆抗体以及碳二亚胺混合，在4～6℃的条件下搅拌1.5～3h进行偶联反应；

再将所得混合溶液超滤后于4000～4500r/min离心15～30min，收集上清液，用细胞破碎仪超声分散后离心、洗涤，再加入50～80mg/mL的海藻糖，重悬后冷冻干燥，得到所述靶向载药丝蛋白纳米粒。

12.如权利要求1所述的靶向载药丝蛋白纳米粒在制备治疗肿瘤的药物中的应用。

13.如权利要求12所述的应用，其特征在于，所述肿瘤包括胰腺癌、黑色素瘤、肺癌或乳腺癌中的任意一种。

14.如权利要求12所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为胰腺癌。