[发明专利]MALDI-TOF MS微生物鉴定样本生物安全前处理方法在审
申请号: | 202110264902.6 | 申请日: | 2021-03-11 |
公开(公告)号: | CN112683990A | 公开(公告)日: | 2021-04-20 |
发明(设计)人: | 肖迪;李园园;张炳华 | 申请(专利权)人: | 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所;北京拓谱科技有限公司 |
主分类号: | G01N27/64 | 分类号: | G01N27/64;G01N1/28;G01N1/34;G01N1/38;C07K1/14 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 陈征 |
地址: | 102206 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | maldi tof ms 微生物 鉴定 样本 生物 安全 处理 方法 | ||
1.一种样本制备床,其特征在于,包括管体,管盖和与管体底部连接的导流柱;
所述管体的底部铺放滤膜或超滤膜,且管体底部设置有开口,所述开口连接导流柱;
所述管盖通过连接部与管体连接,管盖、管体和连接部之间一体成型;
所述管盖的底部封口,具有非镂空的管底平面,盖上管盖后,管盖底部平面能够与管体底部的滤膜或超滤膜相接触。
2.根据权利要求1所述的样本制备床,其特征在于,所述滤膜为膜孔径范围为0.01-0.2μm的滤膜,或孔径范围为5μm的滤膜,或孔径范围为0.002-0.01μm的滤膜。
3.根据权利要求1或2所述的样本制备床,其特征在于,
(1)所述管体自上而下内径均匀一致;所述管盖其嵌入管体的部分自上而下外径均匀一致;管体内径与管盖嵌入管体部分的外径之差d≥0.0001μm;管盖底部周围箍套垫圈;或
(2)管盖底部外径内缩,使管盖嵌入管体部分的纵切面呈现倒“凸”字型,内缩部分的管盖底部周围箍套弹性垫圈;或
(3)管盖嵌入管体的部分上,在距离管盖底部0.1-2 mm距离的设置一内陷凹槽,凹槽内箍套弹性垫圈。
4.一种样本制备装置,其特征在于,含有权利要求1-3任一所述的样本制备床和助力架,所述助力架由底座,样本管架,样本制备床架组成;底座上可拆卸地固定样本管架,样本制备床架可拆卸地固定在样本管架上;
所述样本管架能够放置一个或多个样本管,所述样本制备床架能够放置一个或多个样本制备床;
所述样本制备床架上的样本制备床的导流柱与所述样本管架上的样本管口对应,使样本管能够接收样本制备床导流柱内流出的液体样本。
5.根据权利要求4所述的样本制备装置,其特征在于,还包括压力盖,所述压力盖与底座一侧边缘通过转轴连接,按压压力盖,下压样本制备床架上放置的样本制备床的管盖,使样本管架上的样本管收集到样本制备床导流柱的流出液。
6.权利要求1-3任一所述的样本制备床或权利要求4-5任一所述的样本制备装置在以下任一种应用:
(1)在制备具有生物安全性的待检测样本中的应用;
(2)在蛋白截留纯化中的应用;
(3)通过改变滤膜孔径,用于任意使用目的为截留不同分子量的样本的制作。
7.用于MALDI-TOF MS微生物鉴定的样本生物安全前处理方法,其特征在于,采用权利要求1-3任一所述的样本制备床或权利要求4-5任一所述的样本制备装置制备液体样品。
8.根据权利要求7所述的样本生物安全前处理方法,其特征在于,将待检测的微生物样本加入样本制备床的管体内,加入样本提取液,盖上管盖,通过导流柱得到的流出液用于后续进行质谱鉴定;
所述样本制备床的管体底部仅铺一张滤膜,且滤膜的孔径为0.01-0.2微米。
9.一种具有生物安全性的血液样本前处理方法,其特征在于,采用权利要求1-3任一所述的样本制备床或权利要求4-5任一所述的样本制备装置制备液体样品,先采用滤膜孔径为5微米的样本制备床过滤得到去除血细胞的滤液,再将滤液加入滤膜孔径为0.2微米的样本制备床过滤后弃去滤液,在截留有细菌的样本制备床中加入样本提取液,通过导流柱得到的流出液用于后续进行质谱鉴定。
10.根据权利要求8或9所述的样本前处理方法,其特征在于,所述样品提取液为50%-90%的甲酸和70%-100%的乙腈按1:1的比例混合得到。
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